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小鼠三叉神經(jīng)元細(xì)胞

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-23 15:39:14瀏覽次數(shù):216次

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產(chǎn)品名稱

小鼠三叉神經(jīng)元細(xì)胞

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

分類

原代細(xì)胞

貨號(hào)

GOY-01X1414

商品介紹:

名稱 小鼠三叉神經(jīng)元細(xì)胞

2.組織來(lái)源:三叉神經(jīng)組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠三叉神經(jīng)元細(xì)胞分離自三叉神經(jīng)組織;三叉神經(jīng)為最粗大的混合性腦神經(jīng),含一般軀體感覺(jué)和特殊內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)兩種纖維。其特殊內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)纖維起于腦橋中段的三叉神經(jīng)運(yùn)動(dòng)核,纖維組成三叉神經(jīng)運(yùn)動(dòng)根,由腦橋基底部與腦橋臂交界處出腦,位于感覺(jué)根下內(nèi)側(cè),最后進(jìn)入三叉神經(jīng)第3支下頜神經(jīng)中,經(jīng)卵圓孔出顱,隨下頜神經(jīng)分支分布于咀嚼肌等。運(yùn)動(dòng)根內(nèi)還含有三叉神經(jīng)中腦核有關(guān)的纖維,主要傳導(dǎo)咀嚼肌的本體感覺(jué)。三叉神經(jīng)內(nèi)以軀體感覺(jué)神經(jīng)纖維為主,這些纖維的細(xì)胞體位于三叉神經(jīng)節(jié)(半月節(jié))內(nèi),該神經(jīng)節(jié)位于顱中窩顴骨巖部的前面三叉神經(jīng)壓跡處,為硬腦膜形成的美克爾腔包裹。三叉神經(jīng)節(jié)由假單極神經(jīng)元組成,其中樞突集中構(gòu)成了粗大的三叉神經(jīng)感覺(jué)根,由腦橋基底部與腦橋臂交界處入腦,止于三叉神經(jīng)諸感覺(jué)核,其中傳導(dǎo)痛溫覺(jué)的纖維主要終止于三叉神經(jīng)脊束核;傳導(dǎo)觸覺(jué)的纖維主要終止于三叉神經(jīng)腦橋核。三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的周?chē)唤M成三叉神經(jīng)三大分支,即第1支眼神經(jīng)、第2支上頜神經(jīng)、第3支為下頜神經(jīng)。從3大分支不斷分支分布于面部皮膚、眼及眶內(nèi)、口腔、鼻腔、鼻旁竇的粘膜、牙、腦膜等,傳導(dǎo)痛、溫、觸等多種感覺(jué)。

5.方法簡(jiǎn)介:

()實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠三叉神經(jīng)元細(xì)胞采用消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

()實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠三叉神經(jīng)元細(xì)胞經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件PLL0.1mg/ml

培養(yǎng)基含B-27 SupplementPenicillinStreptomycin

產(chǎn)品貨號(hào)CM-M317

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)神經(jīng)元細(xì)胞樣

傳代特性屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

使用方法:

收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3. 細(xì)胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

 

培養(yǎng)操作:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

ST2  白細(xì)胞介1受體相關(guān)抗體 規(guī)格: 0.1ml

STAT5  信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5抗體 規(guī)格: 0.1ml

RNF156  環(huán)指156抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-SYN1(Ser62+Ser67)  磷化神經(jīng)突觸1抗體 0.1ml

RBPJK/RBP-J  Notch轉(zhuǎn)錄調(diào)控RBPJK抗體 0.2ml

phospho-STAT5b(Ser731)   磷化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5b抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-c-Jun(Ser243)  磷化原基因c-Jun抗體 規(guī)格

小鼠三叉神經(jīng)元細(xì)胞DNA甲基綠瓊脂基礎(chǔ)   進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Dnase Agar Base with Methyl Green用于彎曲桿菌的DNA水解試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))100兔糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

馬尿酸鈉培養(yǎng)基進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)用于彎曲桿菌的馬尿酸鈉水解試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))100兔腎素(Renin)免疫試劑盒*直銷(xiāo)

快速硫化氫(H2S)試驗(yàn)瓊脂進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)用于彎曲桿菌的硫化氫試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))250兔腎上腺素(EPI)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

波爾頓選擇性增菌肉湯進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Bolton Selective Enrichment broth用于彎曲桿菌選擇性增菌培養(yǎng)(Merck方法)250兔神經(jīng)型乙酰受體亞基α7(CHRNA7)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

CCDA基礎(chǔ)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)CCDA Base用于彎曲桿菌分離培養(yǎng)(WHO方法)250兔神經(jīng)肽Y(NPY)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

CCDA添加劑進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)CCDA Supplement每支添加于200mlCCDA基礎(chǔ)中2ml*10支兔色素上皮衍生因子(PEDF)免疫試劑盒*直銷(xiāo)

Campy-Cefex 瓊脂基礎(chǔ)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Campy-Cefex Agar Base用于彎曲桿菌分離培養(yǎng)(FDA方法)250兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

Campy-Cefex 添加劑進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Campy-Cefex Supplement每支添加于200ml Campy-Cefex 瓊脂基礎(chǔ)中2ml*10兔溶菌(LZM)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

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