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測定意義

海藻糖是功能性低聚糖，具有非還原性、保濕性、熱酸穩定性、抗凍結性等特性，是細胞在不良環境條件下產生的一種重要的抗逆應激物之一，它對生物大分子和生物體組織有著非特異性的保護作用。海藻糖合成酶（Trehalose Synthase）催化麥芽糖合成海藻糖，是海藻糖生物合成的關鍵途徑之一。

測定原理：

TS催化麥芽糖產生海藻糖，使用糖化酶分解剩余麥芽糖為葡萄糖，通過葡萄糖氧化酶法測定葡萄糖含量，按照麥芽糖減少的量表示海藻糖合酶活性。

需自備的儀器和用品：

分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

實驗方法學：

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

5-基苯酞 97%亞鈉 CP（劇品）Tenascin  固生蛋白抗原

2-氯烯 99%仲丁 99%TEM 1/CD248(Tumor endothelial marker 1 precursor)  內涎蛋白/內皮唾液酸蛋白抗原

2--3-甲基吡 98%N,N-二甲基乙 99%TFF3 (trefoil factor3)  三葉肽因子3(多肽)

2-氯甲基-3,5二甲基-4-甲氧基吡鹽酸鹽  98%異佛爾酮二 99%TFPI-2 (tissue factor pathway inhibitor-2)  組織因子途徑抑制劑-2抗原

環 98%乙酰乙酸基烯酸乙酯 95%TIEG1/KLF10(TGF-beta inducible early response gene 1)  TGF-β誘導早期應答基因1抗原

環基酮 98%2,2-雙(羥甲基)酸 98%TGF- BetaR1/ALK (TGF-beta receptor type I)  轉移生長因子–β受體1抗原

4-氯-4'-氟苯丁酮 97%1，4-丁二 AR,98%Thioredoxin 1(ERdj5)  硫氧還蛋白抗原

6-氯-2-己酮 98%1,3-丁二 99%Tie1/JTK14 peptide  上皮生長因子樣域激1抗原

海藻糖合成酶(TS)可見分光光度法檢測試劑盒α干擾素(IFN-α)免疫試劑盒進口、分裝

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操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。