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大鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 14:16:20瀏覽次數(shù):132次

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科研細胞
原代細胞
細胞培養(yǎng)
貨號 GOY-01X0834
大鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品:含100ml 緩沖蛋白胨水(BPW)均質(zhì)袋 Buffered Peptone Water 90ml/袋*10500U Dam 甲基轉(zhuǎn)移 Dam Methyltransferase -20℃保存100mL PIPES Buffer,0.5M, pH7.0 PIPES Buffer,0.5M, pH7.0 常溫保存10管 菌種保存液(平板上生長的菌落) St

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

公司細胞現(xiàn)貨供應,質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱

大鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X0834

商品介紹:

名稱 大鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞

2.組織來源:肝臟組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

大鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里最大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。通過控制激素調(diào)控的分泌和吸收,在保持、調(diào)整和擴大膽小管的結(jié)構(gòu)中發(fā)揮重要作用,肝內(nèi)膽管上皮細胞在先天性和獲得性免疫應答方面起著積極作用。肝內(nèi)膽管上皮細胞約占肝細胞總數(shù)的5%,其在肝內(nèi)膽道系統(tǒng)內(nèi)形成復雜的網(wǎng)狀管形結(jié)構(gòu)。肝內(nèi)膽管上皮細胞具有復雜的生理代謝功能,參與肝臟的代謝、排泌、免疫等生理過程,在肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起一定的作用。研究表明,常見的肝內(nèi)膽管病變例如原發(fā)性硬化性膽管炎、膽管癌等疾病,都是以肝內(nèi)膽管上皮細胞為病變靶位,進而引起肝內(nèi)膽管上皮損傷。因此,了解正常肝內(nèi)膽管上皮細胞的生物學特征和病變肝內(nèi)膽管上皮細胞的病理特征對研究肝內(nèi)膽管病變的發(fā)病機制、診斷和治療具有重要意義。

5.方法簡介:

()實驗室分離的大鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞采用膠原酶灌注消化法后,再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化,接種至預先包被鼠尾膠原的培養(yǎng)瓶中,通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

()實驗室分離的大鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產(chǎn)品貨號CM-R038

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)上皮細胞樣

傳代特性可傳1-2

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

培養(yǎng)操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

氧化試紙  10片 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Beta-2-microglobulin

250g α-  AMY (α-Amylase) 4℃保存 15.6-1000 pg/mL 人衰老關(guān)鍵蛋白5 ELISA試劑盒

500mL Tris Buffered Saline(TBS),10X,high salt)  Tris Buffered Saline(TBS),10X,high salt)  常溫保存 0.78-50 nmol/L 同型半(Homocystein

大鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞FOXF1  叉蛋白F1抗體 規(guī)格: 0.2ml

PCDHGA11  原鈣粘蛋白γA11抗體 規(guī)格: 0.2ml

SCN9A/NAV1.7  電壓開啟的鈉離子通道SCN9A抗體 規(guī)格: 0.1ml

Gliomedin/COLM  神經(jīng)膠質(zhì)蛋白(肝相關(guān)基因2)抗體 規(guī)格: 0.2mlCOLEC10(liver)  凝集蛋白家族10抗體(肝) 規(guī)格: 0.2ml

Acetyl-Histone H4(K12)  乙酰化組蛋白H4抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-horse IgM/APC  APC標記的兔抗馬IgM 規(guī)格: 0.1ml

phospho-MAPK8/MAPK9( Thr183+Tyr185)  磷酸化氨基末端激2抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-PDHA1(Ser293)  磷酸化丙酮酸脫α1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-RSK3 (Thr353/356)  磷酸化核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體 規(guī)格: 0.1ml

Donkey Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的驢抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml

肉湯基礎(chǔ) Lysozyme Broth Base 250g

1000U 核酸內(nèi)切 VIII Endonuclease VIII -20℃保存

2 ug pBiFC-VC155 pBiFC-VC155 低溫運輸,-20℃保存

 


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