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大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 11:03:01瀏覽次數:181次

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科研細胞
原代細胞
細胞培養
貨號 GOY-01X0688
大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞公司正在出售的產品:2 ug pMMB66EH pMMB66EH 低溫運輸,-20℃保存100次 dNTP和引物清除劑 dNTP-Primer Erasol -20℃保存1瓶 RTE細胞株 RTE 低溫運輸和保存哥倫比亞CNA血瓊脂 哥倫比亞血瓊脂 250g25mL DEAE瓊脂糖凝膠 6B DEAE-Sepharose CL-6B 4℃保存

公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產品名稱

大鼠型肺泡上皮細胞

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X0688

商品介紹:

名稱 大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞

2.組織來源:肺組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

大鼠型肺泡上皮細胞分離自肺組織;肺泡由單層上皮細胞構成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經多次反復分枝成無數細支氣管,它們的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即為肺泡。小肺泡細胞,又稱I型肺泡細胞,厚約0.1微米,基底部是基底膜,無增殖能力。大肺泡細胞,又稱型肺泡細胞,分泌表面活性物質(二棕櫚酰),以降低肺泡表面張力。型肺泡細胞位于型肺泡細胞之間,數量較型肺泡細胞多,但覆蓋面積比型肺泡細胞小。細胞立方形或圓形,頂端突入肺泡腔。細胞核圓形,胞質著色淺、呈泡沫狀。電鏡下,細胞游離而有少量微絨毛,胞質內富含線粒體和溶酶體,有較發達的粗面內質網和高爾基復合體。核上方有較多的分泌顆粒,電子密度高、大小不等,直徑約0.1-1.0μm顆粒內含有平行排列的板層狀結構,稱為嗜餓性板層小體。小體內的主要成分為磷脂,以二棕櫚酰為主,此外還有糖胺多糖及蛋白質等。顆粒內物質釋放出來后,在肺泡表面形成一層粘液層,稱為表面活性物質(surfactant)。表面活性物質有降低肺泡表面張力、穩定肺泡大小的作用。呼氣時肺泡縮小,表面活性物質密度增加,表面張力降低,防止肺泡過度塌陷;吸氣時肺泡擴張,表面活性物質密度減小,肺泡回縮力加大,可防止肺泡過度膨脹。表面活性物質的缺乏或變性均可引起肺不張,過度通氣可造成表面活性物質缺乏;吸入毒氣可直接破壞表面活性物質。型肺泡細胞有分裂、增殖并分化為型肺泡細胞的潛能,故具有修復受損傷上皮的作用。

5.方法簡介:

()實驗室分離的大鼠型肺泡上皮細胞采用彈性灌注消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的大鼠型肺泡上皮細胞經SP-C免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

包被條件鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-R003

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態上皮細胞樣

傳代特性可傳1-2

消化液0.25%

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

 

培養操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 標簽)

重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標簽)

重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 標簽)

重組人 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標簽)

重組人 NRG4 蛋白

重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 標簽)

重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (EGF Domain, Fc 標簽)

重組狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白 (Hi

大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞0.5mL dCTP溶液,100mM dCTP Solution -20℃保存

2 ug pCMV6-AC-GFP pCMV6-AC-GFP 低溫運輸,-20℃保存

phospho-ILK-1(Ser259)  磷酸化整合素連接激1抗體 規格: 0.1ml

Orexin-A  增食欲素A/欲激素A 規格: 0.1mlBCL2L15  BCL2樣15促凋亡蛋白抗體 規格: 0.2ml

EGF  小鼠抗表皮生因子抗體 0.1ml

Pectinesterase  果膠抗體 規格: 1ml

GK5/Glycerokinase 5  甘油激5抗體 規格: 0.2ml

Caspase-6 (CT)  半胱胺酸蛋白蛋白-6抗體(C端) 規格: 0.1ml

IgHV/IgH  免疫球蛋白重鏈可變區抗體 0.2mlphospho-IRS1(Ser312)  磷酸化胰島素受體底物-1抗體 規格: 0.1ml

VHR/DUSP3  /特定蛋酸抗體 規格: 0.2mlCMKLR1  趨化樣因子受體1抗體 規格: 0.1ml

Phospho-Glycogen synthase 1(Ser641)  磷酸化葡萄糖合成1抗體 規格: 0.1ml

AGPHD1  氨基糖苷類磷酸結構域蛋白抗體 規格: 0.2ml

 


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