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磷酸丙糖異構酶(TPI)紫外分光光度法

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產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-27 10:34:02瀏覽次數:219次

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貨號 GOY-01S6618
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操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。

28.png 

商品屬性:

產品名稱

磷酸丙糖異構酶(TPI)紫外分光光度法檢測試劑盒

規格

50管/48樣

檢測方法

紫外分光光度法

貨號

GOY-01S6618

商品介紹:

測定意義

磷酸丙糖異構酶是重要的糖酵解酶,廣泛存在于動植物及微生物體內,在機體內參與葡萄糖代謝,在糖酵解,糖異生、脂肪酸生物合成及磷酸戊糖代謝中都發揮著重要作用。

測定原理

磷酸丙糖異構酶將磷酸二羥丙酮轉化為3-磷酸甘油醛,3-磷酸甘油醛與NAD在3-磷酸甘油醛脫氫酶的作用下生成3-磷酸甘油酸和NADH,340nm處的吸光度變化反映了磷酸丙糖異構酶的活性的高低。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、研缽、紫外分光光度計、1 mL石英比色皿。

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg1克瓶裝,每瓶140000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50100μl濕潤管壁,可抗凝人血35ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔510分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置12小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

三異基亞酯 90%4-正基乙炔 98%Anti-VAMP-1/Synaptobrevin-1  VAMP1囊泡相關膜蛋白1抗體

三異基亞酯 95%4-正戊基苯酸 97%Anti-VAMP-2  囊泡相關膜蛋白2抗體

硅酸 AR1-溴-4-戊苯 97%Anti-VAMP-3  囊泡相關膜蛋白3抗體

硅酸 99.9% metals basis4-甲基聯苯 98%Anti-VAP1  血管粘附蛋白1抗體

薄層層析硅膠板 50×200mm GF254型號 20片/盒4-正戊基聯苯 99%anti-VASH1  血管抑制蛋白1抗體

薄層層析硅膠 H604-正基環己酮 99%Anti-VHL/HRCA1  VHL腫瘤抑制因子抗體

薄層層析硅膠 GF254 604-基-4'-戊基聯苯 98%Anti-VASP  血管擴張激磷蛋白抗體

薄層層析硅膠 HF254 604-基-4'-戊氧基聯苯 98%Anti-Phospho-VASP (Ser157)  化血管擴張激磷蛋白抗體

磷酸丙糖異構酶(TPI)紫外分光光度法檢測試劑盒葒草苷 分析標準品,≥99%Anti-EDNR-A/FITC  熒光素標記抗內皮素受體A抗體IgG大鼠蛋白激Bγ(PKBG)聯免疫吸附測定試劑盒

千層紙素A  分析標準品,≥98%Anti-EF1a/FITC  熒光素標記延伸因子EF-1a抗體IgG大鼠蛋白激B(PKB)聯免疫吸附測定試劑盒

紫草素  分析標準品,≥97%Anti-EEF2/FITC  熒光素標記真核翻譯延長因子2抗體IgG大鼠蛋白激Cβ1(PKCB1)聯免疫吸附測定試劑盒

毛蕊花糖苷 分析標準品Anti-EEF2k/FITC  熒光素標記真核延伸因子激2抗體IgG大鼠蛋白激Cδ(PKCD)聯免疫吸附測定試劑盒

漢黃芩甙 分析標準品,≥98%Anti-EGF/FITC  熒光素標記因子抗體IgG大鼠蛋白激C-ε(PKCe)聯免疫吸附測定試劑盒

花椒酚 分析標準品,≥98%Anti-EGF-R/FITC  熒光素標記因子受體抗體IgG大鼠蛋白激C-γ(PKCg)聯免疫吸附測定試劑盒

9-蒽 99%Anti-EGFR/FITC  熒光素標記因子受體抗體IgG大鼠蛋白激C-ο(PKCi)聯免疫吸附測定試劑盒

9-蒽 98%Anti-EGFRvIII/FITC  熒光素標記因子受體III型突變體抗體IgG大鼠蛋白激C-θ(PKCq)聯免疫吸附測定試劑盒

9-蒽 98%Anti-EGFR/PE  熒光素PE標記因子受體抗體IgG大鼠蛋白激C-ζ(PKCz)聯免疫吸附測定試劑盒

AR,98%Anti-EGFR /Gold  金標記因子受體抗體IgG大鼠蛋白激C(PKC)聯免疫吸附測定試劑盒

GR,99%Anti-Phospho-EGFR(Ser1046/1047) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠化因子受體抗體IgG大鼠蛋白激1(PK D1)聯免疫吸附測定試劑盒

9-芴 99% Anti-Phospho-EGFR(Thr669) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠化因子受體抗體IgG大鼠蛋白激2(PK D2)聯免疫吸附測定試劑盒

9-芴酮 99%Anti-Egr-1/FITC  熒光素標記早期反應因-1/應急反應生長因1抗體IgG大鼠蛋白激抑制劑α(PKIA)聯免疫吸附測定試劑盒

2-(4-羥)乙 98%Anti-eIF2 alpha/FITC  熒光素標記真核啟動因子2α抗體IgG大鼠蛋白激抑制劑β(PKIB)聯免疫吸附測定試劑盒

環已 CP,98%Anti-eIF4E/FITC  熒光素標記真核翻譯起始因子4E抗體IgG大鼠蛋白激抑制劑γ(PKIG)聯免疫吸附測定試劑盒


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