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葡萄糖6磷酸(6PG)可見分光光度法檢測試劑盒

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更新時間:2022-04-27 10:39:40瀏覽次數(shù):194次

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貨號 GOY-01S6622
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載玻細(xì)胞BCL2蛋白表達(dá)熒光顯

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

28.png 

商品屬性:

產(chǎn)品名稱

葡萄糖6磷酸(6PG)可見分光光度法檢測試劑盒

規(guī)格

50管/24樣

檢測方法

可見分光光度法

貨號

GOY-01S6622

商品介紹:

測定意義

6PG (Glucose-6-phosphate,葡萄糖-6-磷酸,又稱6-磷酸葡萄糖),是糖酵解和磷酸戊糖途徑的中間產(chǎn)物,廣泛存在于動植物體和微生物中。在糖酵解的第一步反應(yīng)中,葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸,然后通過磷酸葡萄糖異構(gòu)酶的催化形成果糖-6-磷酸,以繼續(xù)糖酵解的其它步驟;而在戊糖磷酸途徑中,葡萄糖-6-磷酸是其第一個底物,該過程也是生成NADPH的主要途徑。此外,葡萄糖-6-磷酸也能轉(zhuǎn)化形成糖原或淀粉而被儲存起來。

測定原理:

6-磷酸葡萄糖脫氫酶可催化6PG和NADP+生成6磷酸葡萄糖酸和NADPH,NADPH在1-mPMS的作用下使WST-8顯橙黃色,在450 nm下測定吸光值。

需自備的儀器和用品:

分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。

實驗方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg1克瓶裝,每瓶140000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50100μl濕潤管壁,可抗凝人血35ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔510分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置12小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。

Anti-TERT/FITC  熒光素標(biāo)記端粒逆轉(zhuǎn)錄抗體IgG

Anti-Tetracycline/FITC  熒光素標(biāo)記四環(huán)素抗體IgG

Anti-Tetraspan5/FITC  熒光素標(biāo)記四分子交聯(lián)體5抗體IgG

Anti-Phospho-TBK1/NAK (Ser172) /FITC  熒光素標(biāo)記NF-κB活化激抗體IgG

Anti-T7 tag/FITC  熒光素標(biāo)記T7 tag標(biāo)簽抗體IgG

Anti-T7 tag/HRP  辣根過氧化物標(biāo)記T7 tag標(biāo)簽抗體IgG

Anti-TFF3 /FITC  熒光素標(biāo)記三葉肽因子3抗體IgG

Anti-TFF2/FITC  熒光素標(biāo)記三葉肽因子2抗體IgG

葡萄糖6磷酸(6PG)可見分光光度法檢測試劑盒誘蟲烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品人EB病衣殼抗原(EBVCA)抗體(IgG)免疫試劑盒電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白脫氫抗體NYS48  NYS48蛋白抗體

誘蟲烯 93%人EB病核抗原3A抗體(IgM)免疫試劑盒EGF素受體7跨膜結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體NXPH2  神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白2抗體

-玉米素 98%人EB病核抗原3A抗體(IgG)免疫試劑盒乙激2抗體NXPH1  神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白1抗體

玉米素核苷 97%人EB病核抗原1(EBNA1)抗體(IgG)免疫試劑盒化Ets轉(zhuǎn)錄因子家族ets1抗體NUSAP1  核仁和紡錘體相關(guān)蛋白1抗體

B 80%,750 μg/mg人EB病IgA(EBv IgA)免疫試劑盒化上皮癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體Nurr1  核受體相關(guān)因子-1抗體

鹽倍他司汀 99%人EB病(Ebv)抗體(IgM)免疫試劑盒嗜性粒過氧化物抗體Nur77/GFRP  孤兒核受體蛋白Nur77抗體

 1.5-2.0 units/mg 人EB病(EBv)抗體(IgG)免疫試劑盒核內(nèi)切G抗體NUPR1/p8  核蛋白p8抗體

赫斯特?zé)晒馊剂希?/span>33258 98%人E3泛素蛋白連接TRIM68(TRIM68)抗體免疫試劑盒酪氨蛋白激受體A10抗體NUP88  核孔復(fù)合體蛋白88抗體

3,4-二氧 98%人E3泛素蛋白連接TRIM68(TRIM68)免疫試劑盒胞吐囊復(fù)合體蛋白2抗體NUP54  NUP54抗體

 98%人D-脫氫(D-LDH)免疫試劑盒化4E結(jié)合蛋白1抗體NUP50  核孔蛋白50抗體

多烯紫杉 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%人D-免疫試劑盒化絲裂原活化蛋白激1/2抗體NUP37  核孔蛋白Nup37抗體

D-(+)-麥芽糖一水合物 ≥98.0% (HPLC)人D二聚體(D2D)免疫試劑盒泛素交聯(lián)抗體NUP160  核孔蛋白NUP160抗體

美伐他汀 96%人DNA拓?fù)洚悩?gòu)1()自身抗體免疫試劑盒EB病核抗原-3B抗體NUMB  膜相關(guān)蛋白Numb抗體

 970 μg/mg (USP XXIV)(劇品)人DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子4樣蛋白(DDIT4/RTP801)免疫試劑盒化驅(qū)動蛋白樣蛋白1抗體NuMA  核有絲分裂器NuMA蛋白抗體

分析標(biāo)準(zhǔn)品人DNA轉(zhuǎn)移3A(DNMT3A)免疫試劑盒乙酰轉(zhuǎn)移EID1抗體NUDEL/NDEL1  中心粒蛋白Nudel抗體

 


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