操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。

商品屬性：

商品介紹：

測(cè)定意義

磷脂酶A2（EC3.1.1.4）是磷脂sn-2位脂酰基水解酶，廣泛存在于動(dòng)植物組織、細(xì)菌、細(xì)胞核分泌物中，參與脂肪消化，成熟、細(xì)胞信號(hào)傳遞、脂質(zhì)過氧化修復(fù)、宿主反應(yīng)等生理過程，在控制體內(nèi)磷脂類物質(zhì)平衡、調(diào)節(jié)機(jī)體新陳代謝、參與疾病的病理進(jìn)程等方面發(fā)揮著及其重要的作用。

測(cè)定原理

磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸（HEPC）產(chǎn)生游離巰基，與DTNB反應(yīng)生成黃色物質(zhì)，在412nm處有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、超速冷凍離心機(jī)、研缽、可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿。

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

Anti-SLT/SLT-IIe(O139) /FITC  熒光素標(biāo)記抗豬水腫素（O139）抗體IgG

Anti-Slug/FITC  熒光素標(biāo)記鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體IgG

Anti-Smac/DIABLO/FITC  熒光素標(biāo)記線粒體促凋亡蛋白抗體IgG

Anti-phosphor-SMAD(p-Ser425)、phosphor-Mothers against decapentaplegic/FITC  熒光素標(biāo)記化SMAD抗體IgG

Anti-Smad 1/FITC  熒光素標(biāo)記Smad 1抗體IgG

Anti-Phospho-Smad1 (Ser206) /FITC  熒光素標(biāo)記化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體IgG

Anti-Phospho-Smad1/5 (Ser463/465)/FITC  熒光素標(biāo)記化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1/5抗體IgG

Anti-Smad2/3 /FITC  熒光素標(biāo)記Smad 2/3抗體IgG

磷脂酶A2(PLA2)可見分光光度法檢測(cè)試劑盒二乙酮 98%豬肌U型激,線粒體(CKMT1)免疫試劑盒α2巨球蛋白樣蛋白1抗體 α2ML1VAP1  血管粘附蛋白1抗體

五化 99.998% metals basis豬饑餓激素(GHRL)免疫試劑盒凋亡相關(guān)蛋白3抗體VANGL2  神經(jīng)管畸形相關(guān)蛋白VANGL2抗體

鄰二 99%豬活性氧(ROS)免疫試劑盒肌動(dòng)蛋白α/α-SMA/α Actin抗體VANGL1/LPP2  腫瘤抑制因LPP2抗體

2-噻吩 99%豬活化蛋白C(APC)免疫試劑盒ATP結(jié)合蛋白家族7抗體VAMP-3  囊泡相關(guān)膜蛋白3抗體

噻吩-2-乙 98%豬黃體生成素(LH)免疫試劑盒ASCL2蛋白抗體VAMP-2  囊泡相關(guān)膜蛋白2抗體

乙酰氧肟 98%豬環(huán)腺苷(cAMP)免疫試劑盒化脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體VAMP-1/Synaptobrevin-1  VAMP1囊泡相關(guān)膜蛋白1抗體

雙(2-乙)鹽鹽 98%豬環(huán)鳥苷(cGMP)免疫試劑盒化活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體VAM1/MPP6  棕櫚酰化膜蛋白6抗體

羧氧半鹽鹽 98%豬化學(xué)趨化因子(KC)免疫試劑盒化活化復(fù)制因子2抗體V5 tag  V5 tag標(biāo)簽抗體

水楊羥肟 99%豬紅生成素(EPO)免疫試劑盒化活化復(fù)制因子2抗體V.cholera Ogawa  01群小川型亂弧菌抗體

二二硅烷 CP,掃尾劑豬黑素皮質(zhì)素受體-2(MC2R)免疫試劑盒化活化復(fù)制因子2抗體V.cholera Ogawa  01群稻葉型亂弧菌抗體

二二硅烷  >98.5%(GC)豬核因子-κB(NF-κB)免疫試劑盒化活化復(fù)制因子2抗體UXT/Ubiquitously expressed transcript  廣泛表達(dá)轉(zhuǎn)錄蛋白UXT抗體

亞麻乙酯 80%，天然豬核受體亞家族1,H組,成員4(NR1H4)免疫試劑盒化活化復(fù)制因子2抗體UVRAG/DHTX  輻射耐受相關(guān)蛋白DHTX抗體

亞麻乙酯 98%豬含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪氨激2(Tie-2)免疫試劑盒化活化復(fù)制因子2抗體UTS2R/GPCR GPR14  G蛋白偶聯(lián)受體14抗體

亞麻 ~70% (GC) ，天然豬胱抑素C(CST3/Cys-C)免疫試劑盒活化轉(zhuǎn)錄因子5抗體UTS2D  尾2相關(guān)肽抗體

鈦四丁酯 ≥99.0% (GC)豬胱硫β合(CBS)免疫試劑盒活化轉(zhuǎn)錄因子6β抗體UTP14A/SDCCAG16  結(jié)腸癌抗原16抗體