產品屬性：

產品介紹：

名稱    關節軟骨細胞

2.組織來源：關節軟骨組織

3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介：

人關節軟骨細胞分離自關節軟骨組織；關節軟骨屬于透明軟骨，表面光滑、呈淡藍色、有光澤，它是由一種特殊的叫做致密結締組織的膠原纖維構成的基本框架，這種框架呈半環形，類似拱形球門，其底端緊緊附著在下面的骨質上，上端朝向關節面，這種結構使關節軟骨緊緊與骨結合起來而不會掉下來，同時當受到壓力時候，還可以有少許的變形，起到緩沖壓力的作用。在這些纖維之間，散在分布著軟骨細胞，軟骨細胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細胞組成，這些軟骨細胞維持關節軟骨的正常代謝。關節軟骨沒有神經支配，也沒有血管，其營養成分必須從關節液中取得，而其代謝廢物也必須排至關節液中，關節軟骨的這種營養代謝必須通過關節運動，使關節軟骨不斷的受到壓力刺激才行，所以關節運動對于維持關節軟骨的正常結構起重要的作用。關節軟骨細胞位于關節軟骨陷窩內。幼稚的關節軟骨細胞位于關節軟骨組織的表層，單個分布、體積較小、呈橢圓形，長軸與關節軟骨表面平行，越向深層的關節軟骨細胞體積之間增大呈圓形，細胞核圓形或卵圓形、染色淺，細胞質弱嗜堿性，常見數量不一的脂滴。成熟的關節軟骨細胞多2-8個成群分布于關節軟骨陷窩內，這些關節軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成，稱為同源細胞群。電鏡下，關節軟骨細胞有突起和皺褶，細胞質內有大量的粗面內質網和發達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中，關節軟骨細胞收縮為不規則形，在軟骨囊和細胞之間出現較大的腔隙。體外培養的關節軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

5.方法簡介：

()實驗室分離的人關節軟骨細胞采用膠原酶聯合中性消化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

()實驗室分離的人關節軟骨細胞經Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息：

培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產品貨號CM-H096

換液頻率每3-4天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態梭形、多角形

傳代特性可傳5代左右；3代以內狀態最佳

消化液0.25%

培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩定細胞狀態。

3. 預熱培養基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養基。放到37度培養箱培養。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規定程序處理。

10mL X-Gal溶液，20mg/mL X -Gal Solution -20℃避光保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Matrix metalloproteinase-16

2 ug pOTB7 PPP2R4 pOTB7 PPP2R4 低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人鈣調B亞基1(Calcineurin subunit B type 1)ELISA試劑盒

1%NaCl阿拉伯糖  20支 0.156-10 ng/mL 人可溶性糖蛋白130(

關節軟骨細胞25g L-  L-Leucine    室溫干燥保存

250mL Casein-Tween-20 in TBS  Casein-Tween-20 in TBS  常溫保存

肉湯  20支

2 ug pLVTHM pLVTHM 低溫運輸，-20℃保存

500mL Tris-HCl Buffer,1.0M,pH9.5   Tris-HCl Buffer,1.0M,pH9.5   常溫保存

1.5mL 酵母tRNA溶液A（粗提）(5mg/mL) Yeast tRNA Solution -20℃保存

phospho-HDAC2(Ser394)  磷酸化組蛋白去乙酰化2抗體 規格: 0.1ml

100U 熱啟動Taq DNA聚合 Hot Start Taq DNA Polymerase -20℃保存

CEACAM19/CEAL1  胚抗原相關細胞粘附分子19抗體 規格: 0.2mlphospho-PIK3R1(Tyr467)  磷酸化磷脂酰肌醇激抗體 規格: 0.1ml

KBP  KBP蛋白抗體 規格: 0.2ml

EB2/End binding protein 2  微管相關末端結合蛋白2抗體 規格: 0.2ml

CCDC136/NAG6  鼻咽相關蛋白6抗體 規格: 0.2ml

細胞培養的優點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。