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兔尿道平滑肌細胞

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 15:44:52瀏覽次數:228次

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原代細胞
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貨號 GOY-01X0904
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組織科薩基病毒B(Coxsac

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產品名稱

兔尿道平滑肌細胞

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X0904

商品介紹:

名稱 兔尿道平滑肌細胞

2.組織來源:尿道組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

兔尿道平滑肌細胞分離自尿道管組織;尿道是從膀胱通向體外的管道。起自膀胱的尿道內口,止于尿道外口,行程中通過前列腺部、膜部和陰莖海綿體部,尿道在尿道膜部有一環橫行紋肌構成的括約肌,稱為尿道外括約肌,由意識控制。尿道有三個解剖上的較狹部和膨大部,前者分別位于外口、膜部和內口,后者位于舟狀窩、球部和前列腺部。尿道壁為粘膜層、粘膜下層和肌肉層所組成。在前尿道的外面,還包有豐富的彈力纖維和平滑肌纖維的尿道海綿體。尿道粘膜上皮在前列腺部為移行上皮(近膀胱部),一部分為多列或復層柱狀上皮,在有尿道海綿體的一部分尿道,主要為復層柱狀上皮,在皺襞上也有單層柱狀上皮。特別在舟狀窩內有許多環狀細胞,舟狀窩的遠端部開始有未角化的復層鱗狀上皮。粘膜下層血液供應豐富,主要為結締組織。肌肉層有縱行肌和外環形肌。

5.方法簡介:

()實驗室分離的兔尿道平滑肌細胞采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過平滑肌細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的兔尿道平滑肌細胞α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-Rb056

換液頻率每2-3天換液一次;

生長特性貼壁

細胞形態成纖維細胞樣

傳代特性可傳3-5代左右

消化液0.25%

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

培養操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

2 ug pYES2-FLAG pYES2-FLAG 低溫運輸,-20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Follistatin-related protein 1

50次 柱式真菌DNAout Column Fungal DNAOUT 常溫 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Regulator of G-protein signaling 3

2 ug pE-SUMO pE-SUMO 低溫運輸,-20℃保存 0.312-20

兔尿道平滑肌細胞Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Bio  標記的兔抗人IgG F(ab')2  規格: 0.1mlRabbit Anti-horse IgM/PE  PE標記的兔抗馬IgM 規格: 0.1ml

eIF4G  真核翻譯起始因子4G抗體 規格: 0.1mlNIK/MAPKKK14  NFkB誘導激抗體 規格: 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgG/PE-CY5  PE-CY5標記的兔抗馬IgG 規格: 0.1ml

250mL MES Buffer,0.2M,pH5.5   MES Buffer,0.2M,pH5.5   常溫保存

M-腸道菌瓊脂 M-Enterococcus Agar 250g

l mg Z-VAD-FMK(Caspase Inhibitor) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

2 ug pRSET C pRSET C 低溫運輸,-20℃保存

NDUFS3  線粒體復合物NDUFS3蛋白抗體 規格: 0.2ml

25mg 脫氧核糖核酸 ( 牛胰 ) DNase I ( DeoxyribonucleaseⅠ) -20℃保存

250ml HEPES-Triton Protein Extraction Buffer  HEPES-Triton Protein Extraction Buffer  常溫保存

5次 97孔板病毒RNAout(離心法) 97 Microwell Plate Vrial RNAOUT 4℃保存

2 ug pET-41a-DsRed2 pET-41a-DsRed2 低溫運輸,-20℃保存

 


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