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小鼠腎實質細胞

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 15:36:48瀏覽次數:155次

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產品名稱

小鼠腎實質細胞

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X0902

商品介紹:

名稱 小鼠腎實質細胞

2.組織來源:腎組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

小鼠腎實質細胞分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物,同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質,如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等,以調節水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能,生成腎素、促紅細胞生成素、活性3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內環境的穩定,使新陳代謝得以正常進行。腎臟移植是臨床上治療慢性腎功能衰竭的有效方法,然而這種方法受到供體腎短缺的限制。腎細胞移植可部分解決供體腎短缺的問題,是未來可以替代腎臟移植的*方法。因此,體外腎細胞的培養受到國內外有關專家的密切關注。原代腎細胞作為一種常用的腎臟毒理學研究對象,其分離方法主要有機械研磨分離法和酶消化法,酶消化法因對細胞損傷小、分離效果好而優于機械研磨分離法;目前常用的酶消化法主要是消化法和膠原酶消化法。

5.方法簡介:

()實驗室分離的小鼠腎實質細胞采用膠原酶-混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的小鼠腎實質細胞經檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-M056

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態成纖維細胞樣

傳代特性可傳1-2

消化液0.25%

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

 

培養操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

纖維素剛果紅培養基 Cellulose Cong Red Medium 250g 4.69-300 U/L 人胰腺三酰甘油脂肪(Pancreatic lipase)ELISA試劑盒

1瓶 RCBBF細胞株 RCBBF 低溫運輸和保存 0.78-50 ng/mL 人三結構域蛋白3(TRIM3)ELISA試劑盒

6.5%氯化鈉肉湯 6.5% NaCl Broth 250g 7.8-500 ng/mL 人細胞色素P450 2C19(CYP2C19)ELISA試劑盒

25g L- 鹽酸半 L-Cysteine H

小鼠腎實質細胞Caspase-6 (NT)  半胱胺酸蛋白蛋白-6抗體(N端) 規格: 0.1mlCystatin C/CST3  胱抑素C/半蛋白抑制劑C抗體 規格: 0.2ml

SDHD  線粒體琥珀酸脫D抗體 規格: 0.2ml

GYG2  糖原蛋白2抗體 規格: 0.2ml

Ron  原基因c-Met相關激抗體 規格: 0.1ml

USF-1  等上游刺激因子1抗體 規格: 0.1ml

IFI44  干擾素誘導蛋白44抗體 規格: 0.2ml

UXT/Ubiquitously expressed transcript  廣泛表達轉錄蛋白UXT抗體 規格: 0.2mlBEND5  BEN結構域蛋白5抗體 規格: 0.2ml

500mL Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH2.5  Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH2.5  常溫保存

100mL RNase-free Tris HCl,1M,pH 7.5  常溫

1瓶 hFOB 1.19細胞株 hFOB 1.19 低溫運輸和保存

50T 結核分支桿菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

100次 植物種屬鑒定PCR Mix 11(質體 trnL(P6)) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

 


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