細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    小鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞

2.組織來(lái)源：腸組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：

小鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞分離腸組織；神經(jīng)嵴干細(xì)胞（neural crest stem cells，NCSC），即外周神經(jīng)系統(tǒng)干細(xì)胞，起源于胚胎期的神經(jīng)管背側(cè)，與中樞神經(jīng)系統(tǒng)干細(xì)胞在形態(tài)學(xué)上有著顯著不同，NCSC可表達(dá)低親和力神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體p75NTR而不能分化出少突膠質(zhì)細(xì)胞，而中樞神經(jīng)系統(tǒng)干細(xì)胞與之恰好相反。NCSC可在不同部位分化出多種組織，如神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)、黑色素細(xì)胞、內(nèi)分泌細(xì)胞、平滑肌、骨骼肌及骨等，其中可特異性分化出腸神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)的NCSC，被稱為腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞（gut neural crest stem cells，GNCSC）。

5.方法簡(jiǎn)介：

()實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞采用中性-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè)：

()實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號(hào)CM-M216

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性懸浮

細(xì)胞形態(tài)球形

傳代特性可傳2-3代

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細(xì)胞后，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問(wèn)題，請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細(xì)胞密度較小，無(wú)菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上，進(jìn)行傳代。

實(shí)驗(yàn)操作步驟：  

a．采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動(dòng)物。

b．立即在無(wú)菌超凈臺(tái)內(nèi)用70％乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。

c．用無(wú)菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無(wú)菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無(wú)菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無(wú)菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無(wú)菌的含有無(wú)菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項(xiàng)：

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時(shí)試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

2 ug pET-46 Ek/LIC pET-46 Ek/LIC 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

克氏瓊脂 Kligler's Agar 250g

1瓶 A-875細(xì)胞株 A-875 低溫運(yùn)輸和保存

平板計(jì)數(shù)瓊脂（PCA）顆粒 Plate Count Agar 300ml/袋*10

100次 亞硫酸鹽修飾的DNA  

250mL MOPS Buffer,1.0M,pH6.0   MOPS Buffer,1.0M,pH6.0   常溫保存

250ug lambda（λ） DNA（非甲基化的cl857 Sam7） L

小鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞四環(huán)素檢定瓊脂 英文名稱：Tetracyline Examination Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

葡萄糖胰蛋白胨瓊脂 英文名稱：Glucose Tryptone Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)免疫試劑盒*直銷

蛋白胨鹽溶液 英文名稱：Peptone Salt Solution 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠醇脫氫(SDH)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

檢定培養(yǎng)基 英文名稱：Test Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠沙眼衣原體抗體IgG(CT IgG)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

菌種芽孢培養(yǎng)基 英文名稱：Bacillus Bacteria Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠殺傷細(xì)胞凝集素樣受體亞家族B, 成員1C(Klrb1c/Ly55c/Nkrp1c)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

細(xì)菌保存培養(yǎng)基 英文名稱：Bacterial Storage Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)免疫試劑盒*直銷

BAT培養(yǎng)基 英文名稱：BAT Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠三碘甲狀腺原(T3)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

肝肉瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠乳腺癌標(biāo)志物-CA153免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

DTA培養(yǎng)基 英文名稱：Dextrose Tryptone Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

布氏肉湯 英文名稱：Brucella Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠溶菌(LZM)免疫試劑盒*直銷