產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    大鼠虹膜色素上皮細胞

2.組織來源：眼球

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

大鼠虹膜色素上皮細胞分離自眼球虹膜組織；虹膜是眼睛構(gòu)造的一部分，屬于眼球中層，位于血管膜的最前部；在睫狀體前方虹膜，中心有一圓形開口，稱為瞳孔，猶如相機當中可調(diào)整大小的光圈，內(nèi)含色素決定眼睛的顏色。日間光線較為強烈時，虹膜會收蹜，只使一小束光線穿透瞳孔，進入眼睛；當進入黑暗環(huán)境中，虹膜就會往后退縮，使瞳孔變大，讓更多的光線進入眼睛，多數(shù)的脊椎動物的眼睛都有虹膜。虹膜色素上皮細胞（IPE）是虹膜重要結(jié)構(gòu)組成細胞之一，位于虹膜組織的后面，和視網(wǎng)膜色素上皮細胞（RPE）同樣起源于神經(jīng)外胚葉層，可能具有相似的生物學功能，因此對IPE的研究將為防治因RPE結(jié)構(gòu)或功能異常而導致的眼底病提供新思路。

5.方法簡介：

()實驗室分離的大鼠虹膜色素上皮細胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

()實驗室分離的大鼠虹膜色素上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號CM-R118

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)上皮細胞樣

傳代特性可傳1-2代

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 預熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。

SSDC培養(yǎng)基（ISO） SSDC Medium 250g 0.312-20 ng/mL 人線粒體NADH 脫氫(輔Q) 鐵硫蛋白7 ( NDUFS7)ELISA試劑盒

2 ug pCMV-GFP pCMV-GFP 低溫運輸，-20℃保存 1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Mucin-21

50T 玉米GA21 PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人補體成分C8β鏈(C8G)ELISA試劑盒

15次 動物線粒體純化試劑盒 Anima

大鼠虹膜色素上皮細胞Inhibin Beta C  抑制素βC抗體 規(guī)格: 0.2ml

5-HTR2B  5-羥色胺受體2B抗體 0.1ml

ATG4A  自噬相關(guān)蛋白4A抗體 規(guī)格: 0.2ml

BAT3/BAG6  Bcl2相關(guān)抗凋亡基因6抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-ITGB3(Tyr785)  磷酸化整合素β3抗體 規(guī)格: 0.1ml

CD1A  T淋巴細胞CD1A抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-HER3 (Tyr1197)  磷酸化HER3受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

1瓶 SW13[SW-13]細胞株 SW13[SW-13] 低溫運輸和保存

250mL HEPES Buffer,1M,pH9.0  HEPES Buffer,1M,pH9.0  常溫保存

100次 蛋白折疊試劑盒 Protein Folding Kit 4℃保存

2 ug pGL4.19[lucCP/Neo] pGL4.19[lucCP/Neo] 低溫運輸，-20℃保存

柯氏尿素瓊脂  250g

24 T 葡萄糖-6-脫氫測試盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。