選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評價(jià)。
產(chǎn)品名稱：大鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)elisa試劑盒
英文名稱：Rat cholest erolester transfer protein,CETP ELISA Kit
規(guī)格：48T/96T
保存： 2-8℃（頻繁使用時(shí)）；-20℃（長時(shí)間不用時(shí)）。
有效期： 6 個(gè)月(4℃)；12 個(gè)月（-20℃）。
用途： 用于體外定量分析人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液
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具有如下優(yōu)點(diǎn)：
一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；
五、性價(jià)比非常好，節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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注意事項(xiàng)：
1加樣：
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí)，可分批次操作，以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗(yàn)時(shí)，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個(gè)移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時(shí)間的條件；
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水浴；
3.洗板：
①手工洗板時(shí)，拍板時(shí)要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
白介素1家族成員9(IL1F9)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　短桿狀馬賽菌　1g

增殖關(guān)聯(lián)蛋白2G4(PA2G4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　博斯氏菌屬　250mg

類固醇5α還原酶1(SRD5α1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　戊糖片球菌　5g

膜聯(lián)蛋白A4(ANXA4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　短小芽胞桿菌　25g

角蛋白9(KRT9)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　枯草芽孢桿菌　5g

多功能蛋白聚糖(VS)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　Rh 25.3%　勒仔樹根瘤菌　1g

密封蛋白(OCLN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　Rh 25.3%　微桿菌屬　250mg

分泌型卷曲相關(guān)蛋白1(SFRP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　Rh 25.3%　米曲霉　500mg

運(yùn)動(dòng)因子相關(guān)蛋白1(MRP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　Chryseobacterium　1g

骨成型蛋白3(BMP3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　油菜假單胞菌　250mg

非受體酪氨酸激酶2(TNK2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　95%　產(chǎn)朊假絲酵母　1g

封閉蛋白2(CLDN2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　95%　黑曲霉　5g

肌鈀蛋白(MYPN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　弗蘭克氏菌　1g

血管非炎性蛋白1(VNN1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　灰葡萄孢（灰霉病菌）　5g

鳥苷酸環(huán)化酶激活因子2A(GUCA2A)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　≥98%　天麻蜜環(huán)菌（京-234）*　100g

GM2神經(jīng)節(jié)苷脂激活因子(GM2A)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　≥98%　假單胞菌屬　25g

溶酶體酸性磷酸酶2(ACP2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　≥97% (HPLC)　樟疫霉　50mg

溶酶體酸性磷酸酶2(ACP2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　　1g
大鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)elisa試劑盒印跡覆膜結(jié)合（BLOT OVERLAY BINDING）同位素　EPHA1(Ephrin Type A Receptor 1) 　20 ul

遠(yuǎn)西方雜交（FAR WESTERN BLOT） 印跡消除　F7(Coagulation Factor VII) 　100 ul

蛋白質(zhì)西方雜交10倍印跡膜轉(zhuǎn)移緩沖液　ERK(ELK-Related Tyrosine Kinase) 　20 ul

蛋白質(zhì)西方雜交10倍清理緩沖液　EPHA10(Ephrin Type A Receptor 10) 　100 ul

通用型ECL免疫印跡化學(xué)發(fā)光溶液　EPYC(Epiphycan) 　100 ul

高質(zhì)型ECL免疫印跡化學(xué)發(fā)光溶液　EphA2(Tyrosine protein kinase receptor A2) 　20 ul

持久型ECL免疫印跡化學(xué)發(fā)光溶液　EphA2(Tyrosine protein kinase receptor A2) 　1 Kit

超敏型ECL免疫印跡化學(xué)發(fā)光溶液　ERK(ELK-Related Tyrosine Kinase) 　100 ul

通用型DAB顯色溶液　ERK1(Extracellular Signal Regulated Kinase 1) 　100 ul

增強(qiáng)型DAB顯色溶液　EPYC(Epiphycan) 　100 ul

蛋白免疫雜交封閉溶液　EFNA5(Ephrin A5) 　100 ul

高質(zhì)型ECL化學(xué)發(fā)光顯影　ERα(Estrogen Receptor Alpha) 　100 ul

持久型ECL化學(xué)發(fā)光顯影　EFNA4(Ephrin A4) 　100 ul

超敏型ECL化學(xué)發(fā)光顯影　ERK1(Extracellular Signal Regulated Kinase 1) 　20 ul

免疫組化AP－BCIP/NBT底物顯色　EL/LIPG(Endothelial Lipase) 　100 ul

免疫印跡AP－BCIP/NBT底物顯色　EFNA5(Ephrin A5) 　100 ul
操作流程如下：
（1）僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。