實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產品屬性：

產品介紹：

名稱    大鼠肝實質細胞

2.組織來源：肝臟組織

3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介：

大鼠肝實質細胞分離自肝臟組織；肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用；肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態結構：肝臟位于右上腹，隱藏在右側膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復蓋，僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實質細胞是指具有肝功能的單位，是肝臟的基本組成單位之一。肝實質細胞與主要病生理變化：急性肝炎、肝硬化、肝膿腫。肝實質細胞屬于中高度分化細胞，生長營養需求高，在體外存活時間短；細胞呈圓形或多角形，核大而圓，居中，常染色質豐富，部分有雙核或多倍體核。肝臟作為體內重要的器官，在整個物質代謝過程中具有廣泛而多樣的作用。

5.方法簡介：

()實驗室分離的大鼠肝實質細胞采用混合酶灌流消化、反復低速離心制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

()實驗室分離的大鼠肝實質細胞經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息：

包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產品貨號CM-R033

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態上皮細胞樣

傳代特性可傳1-2代

消化液0.25%

培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩定細胞狀態。

3. 預熱培養基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養基。放到37度培養箱培養。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規定程序處理。

細胞培養的優點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

2 ug pBudCE4.1-EGFP pBudCE4.1-EGFP 低溫運輸，-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人真核翻譯起始因子2-α激3(EIF2AK3)ELISA試劑盒

氯化鈉血瓊脂基礎 Sodium Chloride Blood Agar Base 250g 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Metalloproteinase inhibitor 2

25g 馬來酸鈉 Maleic Acid Disodium Salt Hydrate 室溫陰涼干燥保

大鼠肝實質細胞50次 一步法質粒 DNAout 2.0 One-Step Plasmid DNAOUT 2.0 常溫保存(溶液A需4℃保存)

KCNN4  鈣激活鉀通道蛋白4抗體 規格: 0.1ml

50T 人血管生長因子VEGF-cPCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存

2 ug pGEX-6P-1 pGEX-6P-1 低溫運輸，-20℃保存

2 ug pAc5.1B-EGFP pAc5.1B-EGFP 低溫運輸，-20℃保存

CHDH/Choline dehydrogenase  脫抗體 規格: 0.2ml

10 mg Simvastatin（HMG-CoA Reductase抑制劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

1g 對鈉鹽 p-Nitrophenylphosphate Disodium Salt Hexahydrate（p-NPP） -20℃保存

STAT5b  信號轉導和轉錄激活因子5b抗體 規格: 0.2ml

50次 柱式BAC DNAout  Column BAC DNAOUT 常溫保存(RNase A溶液4℃保存)

Defensin β2/DEFB2/HBD-2  防御素β2抗體 規格: 0.1mlC1orf93  1號染色體開放閱讀框93抗體 規格: 0.2ml

1g  -3- 乙酸 IAA -20℃保存