實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產品屬性：

產品介紹：

名稱    兔肺大靜脈內皮細胞

2.組織來源：肺靜脈組織

3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介：

兔肺大靜脈內皮細胞分離自肺大靜脈組織；肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中，把動脈血由肺送回心臟的靜脈，是一個靜脈里流動脈血的血管。左右1對，共4條，兩條連接右肺，兩條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接，而與右心房或體靜脈系統連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓，是由于肺靜脈內血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下，肺循環具有血壓低、阻力小和順應性大的特點，肺動脈壓力高低取決于單位時間內肺動脈血流量和肺血管的阻力，要維持肺循環的低壓、低阻的狀態，必須保證整個肺循環系統的暢通無阻，血液順利地由肺動脈經毛細血管進入肺靜脈，再入左心室，經過左心室收縮進入體循環，才能避免肺動脈內壓力升高。細胞呈多邊形鵝卵石狀排列；該細胞在維持血管內外的動態平衡、合成和分泌細胞因子和介質、維持凝血和纖溶的動態平衡中起重要作用。

5.方法簡介：

()實驗室分離的兔肺大靜脈內皮細胞采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

()實驗室分離的兔肺大靜脈內皮細胞經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息：

包被條件PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產品貨號CM-Rb045

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態內皮細胞樣

傳代特性可傳1-3代

消化液0.25%

培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩定細胞狀態。

3. 預熱培養基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養基。放到37度培養箱培養。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規定程序處理。

細胞培養的優點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

1瓶 786-O細胞株 786-O 低溫運輸和保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Collagen alpha-3(IX) chain

1個 0.5mLDNA超濾離心管(90-150KD)   78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Argininosuccinate synthase

2 ug pCMV5-HA pCMV5-HA 低溫運輸，-20℃保存 0.625-40 ng/mL 口蹄疫病毒O亞型(FMDV-O)核酸檢測試劑盒(PCR

兔肺大靜脈內皮細胞P-cadherin  P-鈣粘附分子抗體 規格: 0.1ml

PLAU/UPA/Urokinase  尿激型纖溶原激活因子抗體 規格: 0.1mlANKRD28  錨蛋白重復域28抗體 規格: 0.2ml

NOX4/NADPH oxidase 4  NADPH氧化4抗體 0.1ml

GPI  糖磷脂酰肌醇抗體 規格: 0.1mlCD84/SLAMF5  CD84抗體 規格: 0.1ml

PCNA(1C11)  小鼠增細胞核抗原單克隆抗體 規格: 0.1ml

GABBR2/GB2  G氨基丁酸B型受體2抗體 規格: 0.1ml

phospho-PRKCZ(Thr500)  磷酸化蛋白激C(T500)抗體 規格: 0.2ml

ZWINT  著絲粒ZW10相互作用蛋白1抗體 規格: 0.2ml

ETS2  基因ETS2抗體 規格: 0.2ml

BCHE(1E8)  丁酰酯單克隆抗體 規格: 0.2ml

伊紅美藍瓊脂（顆粒）  250g

E2F2  轉錄因子E2F-2抗體 規格: 0.1ml