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大鼠外周血中性粒細胞

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-19 14:33:34瀏覽次數:144次

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生化檢測試劑盒
科研細胞
原代細胞
細胞培養
貨號 GOY-01X1244
大鼠外周血中性粒細胞公司正在出售的產品:Proteasome 20S alpha 6 體PSMα6抗體 規格: 0.2ml
S100 alpha 2 S100A2抗體 規格: 0.2ml
CD19 CD19抗體 0.1ml
CD44v4 CD44V4抗體 規格: 0.1ml
SPINT2/HAI2/HGFA Inhibitor 2 肝細胞生因子激活抑制蛋白2抗體 規格: 0.1ml
Ra

公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產品名稱

大鼠外周血中性粒細胞

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X1244

商品介紹:

名稱 大鼠外周血中性粒細胞

2.組織來源:外周血

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

大鼠外周血中性粒細胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。白細胞是一類無色、球形、有核的血細胞。白細胞不是一個均一的細胞群,根據其形態、功能和來源部位可以分為三大類:粒細胞、單核細胞和淋巴細胞,其中粒細胞又可根據胞質中顆粒的染色性質不同,分為中性粒細胞、嗜酸粒細胞和嗜堿粒細胞三種。中性粒細胞是在瑞氏(Wright)染色血涂片中,胞質呈無色或極淺的淡紅色,有許多彌散分布的細小的(0.20.4微米)淺紅或淺紫色的*顆粒。細胞核呈桿狀或25分葉狀,葉與葉間有細絲相連。中性粒細胞具趨化作用、吞噬作用和殺菌作用。中性粒細胞來源于骨髓,具有分葉形或桿狀的核,胞漿內含有大量既不嗜堿也不嗜酸的中性細顆粒。這些顆粒多是溶酶體,內含髓過氧化酶、、堿性磷酸酶和酸性水解酶等豐富的酶類,與細胞的吞噬和消化功能有關。中性粒細胞在血液的非特異性免疫中起著十分重要的作用,它處于機體抵御微生物病原體,特別是在化膿性細菌入侵的第一線,具有很強的吞噬活性,可吞噬細菌、衰老的紅細胞、抗原一抗體復合物和壞死的細胞等。中性粒細胞內含有大量溶酶體酶,因此能將吞噬入細胞內的細菌和組織碎片*分解。當中性粒細胞吞噬數十個細菌后,自身發生解體,所釋出的各種溶酶體酶類能溶解周圍組織而形成膿液。中性粒細胞是人體內壽命最短的細胞,一般體外培養12-24h內活性穩定,48h活性下降,96h基本死亡。

5.方法簡介:

()實驗室分離的大鼠外周血中性粒細胞采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的大鼠外周血中性粒細胞經瑞氏染色法,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-R186

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性懸浮

細胞形態圓形

傳代特性不增殖;不傳代

消化液0.25%

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

 

培養操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

5g 胞 Cytosine 室溫保存

50T 腸道病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

30次 一站式Blue Native PAGE電泳套裝  

2 ug pYCPlac33 pYCPlac33 低溫運輸,-20℃保存

10次 百萬堿基級細菌(G+)DNAout  

2 ug pET-35b(+) pET-35b(+) 低溫運輸,-20℃保存

OXA添加劑 OXA Additive 1ml/支*5

1瓶 293E細胞株 293E 低溫運輸和保存

1000支 1000 μL RNase-free?嵌?L?

大鼠外周血中性粒細胞抗生素檢定培養基2號(高pH) Antibiotic Agar NO.2 250g

500mL MOPS-EDTA-Sodium Acetate Buffer (MESA),10X MOPS-EDTA-Sodium Acetate Buffer (MESA),10X 常溫保存

phospho-PRKAB1(Ser182)  磷酸化苷單磷酸活化蛋白激β1抗體 規格: 0.1ml

1瓶 LLC-PK1細胞株 LLC-PK1 低溫運輸和保存

XBP-1  細胞核轉錄因子X盒結合蛋白抗體 規格: 0.1ml

2 ug pX459 pX459 低溫運輸,-20℃保存

CDC14B  細胞分裂周期蛋白14B抗體 規格: 0.2ml

25g 乙烯利 Ethrel   4℃保存

SNX1/Sorting nexin1  分選連接蛋白1抗體 0.2ml

phospho-IKK gamma (Ser85)  磷酸化KB抑制蛋白激γ抗體 規格: 0.1mlNCKAP1  膜相關的蛋白質HEM2抗體 規格: 0.2ml

CRCT1  富含半C端蛋白1抗體 規格: 0.2mlphospho-ATF2(Ser94)  磷酸化活化復制因子2抗體 規格: 0.1ml

小腸結腸炎耶爾森氏菌成套生化鑒定管  10種*2套/盒*5盒

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