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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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大鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-19 14:23:46瀏覽次數(shù):181次

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科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
貨號(hào) GOY-01X1236
大鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:巨大戟-3-O-當(dāng)歸酸酯 75567-37-2 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
Celgosivir 121104-96-9 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
巴卡亭III 27548-93-2 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
異連翹酯苷A 1357910-26-9 規(guī)格: HPL

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供最新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

產(chǎn)品名稱(chēng)

大鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

分類(lèi)

原代細(xì)胞

貨號(hào)

GOY-01X1236

商品介紹:

名稱(chēng) 大鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞

2.組織來(lái)源:外周血

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

大鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱(chēng)為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類(lèi)開(kāi)始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)即外周血中具有單個(gè)核的細(xì)胞,包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。目前,主要的分離方法是密度梯度離心法,因?yàn)檠褐懈饔行纬煞值谋戎卮嬖诓町悾虼说靡苑蛛x出不同的細(xì)胞。

5.方法簡(jiǎn)介:

()實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞采用取外周血、通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

()實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)過(guò)檢測(cè),且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin

產(chǎn)品貨號(hào)CM-R183

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性懸浮

細(xì)胞形態(tài)圓形

傳代特性不增殖;不傳代

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

使用方法:

收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3. 細(xì)胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

 

培養(yǎng)操作:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi);

1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

肝湯 Liver Broth 250g

10g 植酸鈉 Phytic Acid Sodium Salt Hydrate 室溫陰涼保存

50T 人線(xiàn)粒體DNA PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

1 g  GSH(抗氧化劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

250mL Dextrose Gelatin Veronal DGV  Dextrose Gelatin Veronal DGV  常溫保存

100mL 核酸印跡膜染液 Nucleic Ac?嵌?L?

大鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞ZNF268  鋅指脂蛋白-1c抗體 規(guī)格: 0.1mlBRCC3/BRCC36  易基因復(fù)合物亞基蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

IHH  HHG2抗體 規(guī)格: 0.2ml

PDSS2  抑蛋白DLP1抗體 規(guī)格: 0.2ml

TNF alpha  瘤壞死因子-α/TNFα抗體 規(guī)格: 0.2ml

KLK3/Prostate Specific Antigen  激肽釋放3/舒管素3抗體 規(guī)格: 0.2ml

DICER1/Dicer  核糖核酸Dicer抗體 規(guī)格: 0.1ml

CT DNA(calf thymus DNA)  小牛胸DNA抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-Chicken IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗雞IgG 規(guī)格: 0.1mlphospho-P53(Ser46)  磷酸化瘤抑制基因P53抗體 規(guī)格: 0.1ml

50T 呼吸道病毒多重PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

0.25mL CTP溶液,100mM CTP Solution -20℃保存

2 ug pDEST22 pDEST22 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基管  10ml*20支/包

 


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