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輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒可見分光光度法

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產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-08-15 17:13:43瀏覽次數:535次

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貨號 BJ-016111-2
輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒可見分光光度法公司正在出售的產品:芳香乙酰胺脫乙酰基酶樣蛋白3抗體ACN9蛋白抗體
雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體腺苷酸激酶抗體α2巨球蛋白樣蛋白1抗體 α2ML1細胞凋亡相關蛋白3抗體肌動蛋白α/α-SMA/α Actin抗體

特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產品名稱檢測方法規格貨號
輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒可見分光光度法可見分光光度法50管/24樣BJ-016111-2

商品介紹:

測定意義

輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循環(TCA)的主要氫受體,生成的NADH經呼吸電子鏈(ETC)傳遞把電子交給氧,在合成ATP的同時,形成大量的ROS,同時NADH再生為NAD+。糖、脂、蛋白質三大代謝物質分解中的氧化反應絕大部分通過這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評價糖酵解和TCA循環的強弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值說明細胞呼吸耗氧量較高,處于過氧化狀態。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環。另外,NAD+降解產物對細胞信號傳導、代謝和基因表達等具有重要的調控作用。

測定原理

分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH,NADH通過PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(MTT)為甲瓚,在570nm下檢測吸光值;而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH,進一步采用MTT還原法檢測。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

優點如下:

1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。

2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。

5、再現性好:變異系數CV=1.7%。

6、回收試驗: X =103.3%。

7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。

8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。

10.png

測定步驟:

1、 酶標儀預熱30min以上,調節波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A。

注意事項:

待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復凍融會導致SOD部分失活。

一個試劑盒如果不能在3次內使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當分裝,以避免反復凍融導致的檢測效果下降。

標準品稀釋時所用的稀釋液應盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標準品也宜使用SOD樣品制備液進行稀釋;當樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標準品。

抗氧化物會對本試劑盒的檢測產生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。

輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒    輔酶Ⅱ系列    50管/24樣    可見分光光度法

NAD激酶(NADK)測試盒    輔酶Ⅱ系列    100管/48樣    微量法

NAD激酶(NADK)測試盒    輔酶Ⅱ系列    50管/24樣    可見分光光度法

NADP磷酸酶(NADPase)測試盒    輔酶Ⅱ系列    100管/96樣    微量法

NADP磷酸酶(NADPase)測試盒    輔酶Ⅱ系列    50管/48樣    可見分光光度法

6磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)/葡萄糖6磷酸脫氫酶測試盒    輔酶Ⅱ系列    100管/96樣    微量法

6磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)/葡萄糖6磷酸脫氫酶測試盒    輔酶Ⅱ系列    50管/48樣    紫外分光光度法

胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)測試盒    輔酶Ⅱ系列    100管/96樣    微量法

胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)測試盒    輔酶Ⅱ系列    50管/48樣    紫外分光光度法

NADP蘋果酸酶(NADPME)測試盒    輔酶Ⅱ系列    100管/96樣    微量法

NADP蘋果酸酶(NADPME)測試盒    輔酶Ⅱ系列    50管/48樣    紫外分光光度法

NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒    輔酶Ⅱ系列    100管/96樣    微量法

NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒    輔酶Ⅱ系列    50管/48樣    紫外分光光度法

6磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6PGDH)測試盒    輔酶Ⅱ系列    100管/96樣    微量法

6磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6PGDH)測試盒    輔酶Ⅱ系列    50管/48樣    紫外分光光度法

肌酸激酶(CK)測試盒    輔酶Ⅱ系列    100管/96樣    微量法

肌酸激酶(CK)測試盒    輔酶Ⅱ系列    50管/48樣    紫外分光光度法

脂肪酸合成酶(FAS)測試盒    輔酶Ⅱ系列    100管/96樣    微量法

脂肪酸合成酶(FAS)測試盒    輔酶Ⅱ系列    10管/9樣    紫外分光光度法

脂肪酸合成酶(FAS)測試盒    輔酶Ⅱ系列    25管/24樣    紫外分光光度法

脂肪酸合成酶(FAS)測試盒    輔酶Ⅱ系列    50管/48樣    紫外分光光度法

AIMP2抗體

乙酰酶抗體

5-氨基乙酰丙酸合酶1抗體

防御素α1/3抗體

ABC膜轉運蛋白抗體

植物延長蛋白

A-Raf抗體

磷酸化A-Raf抗體

紅細胞腺苷脫氨酶3抗體

雄激素結合蛋白抗體

肝再生增強因子抗體

APP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體

甲胎蛋白單克隆抗體

甲胎蛋白單克隆抗體

ADP核糖基化因子結合蛋白1抗體

芳香烴受體抗體

吸引素抗體

腺苷三磷酸結合盒轉運體A1抗體

蛋白激酶B2

輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒可見分光光度法血管生成素2抗體

芳香化酶/細胞色素P450/雌激素合成酶抗體

腺苷A2A受體抗體

蛋白激酶A錨定蛋白95抗體

頂膜鈉依賴性膽鹽轉運體蛋白抗體    

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后




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