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NADP蘋果酸酶(NADPME)測試盒微量法

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產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-08-15 17:19:37瀏覽次數:321次

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貨號 BJ-0161120-1
NADP蘋果酸酶(NADPME)測試盒微量法公司正在出售的產品:神經調節蛋白1抗體TORC1/CRTC1/FITC 熒光su標記環腺應答元件結合蛋白轉錄共激活因子TORC1抗體IgG
神經膠質生長因子/神經調節蛋白β抗體Torc2/Crtc2/FITC 熒光su標記CREB轉錄共激活因子TORC2抗體IgG
甲基化多聚腺結合抗體植物組織可溶性膜粗提制備試劑盒
太平洋硫膨大桿菌植物組織可溶性

特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產品名稱

檢測方法

規格

貨號

NADP蘋果酸酶(NADPME)測試盒微量法

微量法

100管/96樣

BJ-0161120-1

商品介紹:

測定意義:

ME廣泛存在于微生物、培養細胞、動物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應,產生丙酮酸和CO2,以及伴隨NAD(P)+的還原反應,是蘋果酸代謝的關鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關。近年來植物ME活性測定較多,已經成為抗氧化研究的熱點。根據fu酶專一性和對底物特異性的不同,可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。

測定原理:

NADP-ME催化NADP+還原成NADPH,在340nm下測定NADPH增加速率。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

優點如下:

1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。

2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。

5、再現性好:變異系數CV=1.7%。

6、回收試驗: X =103.3%。

7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。

8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。

10.png 

測定步驟:

1、 酶標儀預熱30min以上,調節波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A。

注意事項:

待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復凍融會導致SOD部分失活。

一個試劑盒如果不能在3次內使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當分裝,以避免反復凍融導致的檢測效果下降。

標準品稀釋時所用的稀釋液應盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標準品也宜使用SOD樣品制備液進行稀釋;當樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標準品。

抗氧化物會對本試劑盒的檢測產生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。

an酸羥化酶抗體細枝孢大鼠腎足突*培養基

腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體抗體嗜麥芽黃單胞菌大鼠頸上皮*培養基

轉甲狀腺su蛋白/前白蛋白抗體樟疫霉小鼠肝實質*培養基

端粒體復制結合因子1抗體簡青霉大鼠角膜上皮*培養基

an酸激酶A抗體Enterobacter sp.大鼠腦靜脈血管平滑肌*培養基

腫瘤壞死因子受體相關因子1抗體鼠李糖乳桿菌大鼠小梁網*培養基

腫瘤壞死因子受體相關因子2抗體平流層芽孢桿菌大鼠內臟脂肪*培養基

微管相關蛋白抗體黃曲霉小鼠淋巴管內皮*培養基

Tar DNA 結合蛋白43抗體植物乳桿菌植物亞種大鼠小腦顆粒*培養基

粘合su(固生蛋白)抗體玉米黑粉菌大鼠腎實質*培養基

三葉肽因子3抗體香菇大鼠平滑肌*培養基

組織因子途徑抑制劑-2抗體葡萄座腔菌大鼠神經小膠質*培養基

轉移生長因子α抗體(TGFα)亞褐鈸孔菌大鼠腦動脈血管內皮*培養基

轉化生長因子β1抗體(TGFβ1)*百脈根根瘤菌大鼠腸粘膜上皮*培養基

轉移生長因子β2抗體(TGFβ2)多主葡萄殼菌小鼠肝內膽管上皮*培養基
NADP蘋果酸酶(NADPME)測試盒微量法Toll樣受體2(TLR2)試劑盒Anti-CUL2 Antibody磷酸化周期檢查控制蛋白質

鞘磷脂(SM/SPH)試劑盒 Anti-CUL3 Antibody磷酸化減數分裂重組蛋白家族REC8

轉錄激活因子6(ATF6)試劑盒 Anti-CUL4B AntibodyATP依賴解旋酶RENT1

26S蛋白mei體(26S-PSM)試劑盒  Anti-CUL2 AntibodyRas相關雌調節生長抑制蛋白

阿黑皮su原(POMC)試劑盒Anti-CUL4A Antibody核酮糖1,5二磷酸羧化酶

抗乙酰受體(Anti-AChR)試劑盒Anti-CX3CL1 Antibody急性髓白血病1蛋白

血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)試劑盒Anti-CXCL1 Antibody指狀蛋白RET   

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后


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