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上海邦景實業(yè)有限公司
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線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)紫外分光光度法

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時間:2022-08-17 15:41:58瀏覽次數(shù):252次

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貨號 BJ-01611148-2
線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)紫外分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:myelin P0 prothein( peripheral myelin prothein Zero;MPZ;MPP) 外周髓鞘蛋白0(P0蛋白)多肽抗原
胰島su生長因子樣家族成員4抗體Insulin protein (from porcine pancreas) 豬胰島su蛋白
22255-40-9標(biāo)準(zhǔn)品人載脂A1標(biāo)準(zhǔn)

商品介紹:

測定意義:

MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細(xì)胞多種生理活動中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的fu酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH,細(xì)菌中通常只含有NAD-MDH,在真核細(xì)胞中,NAD-MDH分布于細(xì)胞質(zhì)和線粒體中。

測定原理:

MDHm催化NADH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導(dǎo)致340nm處光吸收下降。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱

檢測方法

規(guī)格

貨號

線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)紫外分光光度法

紫外分光光度法

50管/48樣

BJ-01611148-2

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測定步驟:

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。

注意事項:

待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復(fù)凍融會導(dǎo)致SOD部分失活。

一個試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。

實驗方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

優(yōu)點如下:

1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。

2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。

5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗: X =103.3%。

7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強。

8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。

基質(zhì)金屬蛋白mei20抗原釀酒酵母猴趨化因子CCL4樣蛋白1(CCL4L1)elisa定量檢測試劑盒

基質(zhì)金屬蛋白mei-17抗原赭曲霉猴前列腺suE合酶2(PTGES2)elisa定量檢測試劑盒

基質(zhì)金屬蛋白mei-26抗原Burkholderia sp. 猴鈣腔蛋白(CALU)elisa定量檢測試劑盒

基質(zhì)金屬蛋白mei-9抗原雜色曲霉猴胱天蛋白mei9(P9)elisa定量檢測試劑盒

基質(zhì)金屬蛋白mei-10抗原Asticcacaulis?兔趨化因子CC受體樣蛋白1(CCRL1)elisa定量檢測試劑盒

髓過氧化物酶抗原中國農(nóng)大湖積物桿菌兔血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)elisa定量檢測試劑盒

多藥耐藥相關(guān)蛋白2克魯斯假絲酵母猴鳥苷酸結(jié)合蛋白4(GBP4)elisa定量檢測試劑盒

多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗原猴游離睪酮(F-TESTO)elisa定量檢測試劑盒

線粒體核糖體蛋白L28(抗原)黑曲霉猴胞漿磷蛋白1(STMN1)elisa定量檢測試劑盒

錯配修復(fù)蛋白1抗原枯斑擬盤多毛孢兔前列腺酸性磷酸酶(ACP3/PAP)elisa定量檢測試劑盒

胃粘液su抗原暗黃紫色小單孢菌兔免疫球蛋白G3(IgG3)elisa定量檢測試劑盒

褪黑su受體1B抗原HLE(人肝癌(未分化))兔強啡肽(Dyn)elisa定量檢測試劑盒

胃動su多肽根瘤菌兔GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)elisa定量檢測試劑盒

雷帕霉su靶蛋白根瘤菌猴絲an酸蛋白mei2(PRSS2)elisa定量檢測試劑盒

粘蛋白-1/上皮膜貝氏隱飽子蟲猴Ⅰ型膠原α1(COL1α1)elisa定量檢測試劑盒
線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)紫外分光光度法和肽su(CPP)試劑盒 Anti-MAPK6 Antibody血管內(nèi)皮生長因子受體2

胱天蛋白mei10(P10)試劑盒 Anti-MAPK8 Antibody血管內(nèi)皮生長因子受體3

脂筏特征蛋白2(FLOT2)試劑盒  Anti-MAPT Antibody波形蛋白

緊密結(jié)合蛋白1(TJP1)試劑盒Anti-MAPK8 Antibody血管活性腸肽

血栓烷受體(TP/TXA2R)試劑盒Anti-MAS1 Antibody內(nèi)脂su/內(nèi)臟脂肪su/前B克隆增強因子1

巨噬清道夫受體1 (MSR1)試劑盒Anti-MAPK9 Antibody內(nèi)脂su/內(nèi)臟脂肪su/前B克隆增強因子1

阻抑su(PHB)試劑盒Anti-MASP2 Antibody玻璃粘連蛋白


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