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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第10年

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丙酮酸脫羧酶(PDC)測(cè)試盒微量法

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-08-15 17:04:48瀏覽次數(shù):208次

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貨號(hào) BJ-016119-1
丙酮酸脫羧酶(PDC)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:半乳糖轉(zhuǎn)移2抗體CD14/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記CD14蛋白抗體IgG
磷化異染色質(zhì)蛋白1抗體(果蠅)NHE1/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記鈉氫通道蛋白抗體IgG
1318-02-1人造沸石組H3-K23乙化檢測(cè)試劑盒
糖皮質(zhì)激受體β抗體組H3-K27乙化檢測(cè)試劑盒
莪術(shù)烯:19431-84-6組H3-K36乙化檢測(cè)試劑盒
王不留行

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱

檢測(cè)方法

規(guī)格

貨號(hào)

丙酮酸脫羧酶(PDC)測(cè)試盒微量法

微量法

100管/96樣

BJ-016119-1

商品介紹:

測(cè)定意義:

PDC主要存在于酵母中,是乙醇發(fā)酵的關(guān)鍵酶之一,催化丙酮酸脫羧生成乙醛。

測(cè)定原理:

PDC催化丙酮酸脫羧生成乙醛,添加乙醇脫氫酶(ADH)來(lái)進(jìn)一步催化 NADH還原乙醛生成乙醇和NAD+;NADH在340 nm有吸收峰,而NAD+沒(méi)有;通過(guò)測(cè)定340 nm光吸收下降速率,來(lái)計(jì)算PDC活性。

自備儀器和用品:

研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。

優(yōu)點(diǎn)如下:

1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。

2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。

5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗(yàn): X =103.3%。

7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。

8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。

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測(cè)定步驟:

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。

2、 試劑三的稀釋?zhuān)簩⒃噭┤谜麴s水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。

注意事項(xiàng):

待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。

一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋?zhuān)划?dāng)樣品為血液等無(wú)需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來(lái)的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒(méi)有顏色,如果設(shè)置了使用說(shuō)明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。

腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白8抗體鏈霉菌95-D(人高轉(zhuǎn)移肺癌)

TBC結(jié)構(gòu)域TBCD4蛋白抗體煙色離褶傘A2780(人卵巢癌)

腫瘤壞死因子受體相互作用蛋白抗體白被黑蛋巢786-O(人腎透明癌)

腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白4抗體芽孢桿菌小鼠胎兒成纖維*培養(yǎng)基

結(jié)構(gòu)蛋白家族1抗體柯氏黑蛋巢BxPC-3(人原位胰腺腺癌)

癌雌激su誘導(dǎo)蛋白抗體棒曲霉A673(人橫紋肌瘤)

跨膜蛋白18抗體大腸埃希菌293A (人胚腎)

磷酸化雌激su反應(yīng)指狀蛋白抗體尖孢鐮刀菌小鼠氣管上皮*培養(yǎng)基

磷酸化神經(jīng)特異性微管蛋白抗體釀酒酵母小鼠小梁網(wǎng)*培養(yǎng)基

瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白7抗體(M亞家族)pBBRMCS-2小鼠直腸平滑肌*培養(yǎng)基

“冷"蛋白TRPM8抗體動(dòng)物雙歧桿菌C6(大鼠膠質(zhì)瘤)

瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白3抗體(M亞家族)華美鏈霉菌CRFK(貓腎)

雌激su反應(yīng)鋅指蛋白抗體芽孢桿菌Calu-1(人肺癌)

TWIST蛋白2抗體抗體立枯絲核菌(測(cè)序正確)BEL-7402(人肝癌)

磷酸化雌激su反應(yīng)指狀蛋白抗體絨毛栓菌胰凝乳蛋白mei(含100mL酶解緩沖液)
丙酮酸脫羧酶(PDC)測(cè)試盒微量法衰變加速因子(DAF)試劑盒 Anti-COL17A1 Antibody減數(shù)分裂同源蛋白1

BCL2修飾因子(BMF)試劑盒Anti-COL1A1 AntibodyRAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白7

Bcl2關(guān)聯(lián)永生基因3(BAG3)試劑盒Anti-COL1A1 Antibody環(huán)指蛋白74(重組激活基因1)

叉頭框蛋白P3(FOXP3)試劑盒Anti-COL18A1 Antibody重組激活基因2蛋白

嗜環(huán)蛋白/親環(huán)suA(CYPA)試劑盒 Anti-COL2A1 Antibody受體表達(dá)蛋白5/息肉相關(guān)蛋白

天青殺su1(AZU1)試劑盒  Anti-COL1A1 Antibody染色體分離調(diào)節(jié)蛋白1

抑制蛋白β1(ARRβ1)試劑盒Anti-COL3A1 Antibody復(fù)制激活因子C1   

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后


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