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羧酸酯酶(CarE)測試盒微量法

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產品型號

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廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-08-17 13:58:00瀏覽次數:209次

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貨號 BJ-01611125-1
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商品介紹:

測定意義:

哺乳動物CarE,也稱脂族酯酶(aliesterase),廣泛分布于組織和器官,屬于絲an酸水解酶家族。CarE催化含酯鍵、酰胺鍵和硫酯鍵的內源性與外源性物質水解,但不能催化水解乙酰及其類似物。CarE參與脂質運輸和代謝,并且與多種藥物、環境毒物以及致癌物的解毒和代謝有關,有機磷農藥可結合并且抑制CarE活性。

測定原理:

CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯,固籃顯色;在450 nm光吸收增加速率,計算CarE活性。

自備儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、低溫離心機、水浴鍋、可調式移液槍和蒸餾水。

特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產品名稱

檢測方法

規格

貨號

羧酸酯酶(CarE)測試盒微量法

微量法

100管/96樣

BJ-01611125-1

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測定步驟:

1、 酶標儀預熱30min以上,調節波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A。

注意事項:

待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復凍融會導致SOD部分失活。

一個試劑盒如果不能在3次內使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當分裝,以避免反復凍融導致的檢測效果下降。

標準品稀釋時所用的稀釋液應盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標準品也宜使用SOD樣品制備液進行稀釋;當樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標準品。

抗氧化物會對本試劑盒的檢測產生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

優點如下:

1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。

2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。

5、再現性好:變異系數CV=1.7%。

6、回收試驗: X =103.3%。

7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。

8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。

半胱an酸蛋白mei8抗原米曲霉豬S100鈣結合蛋白B (S100B)elisa定量檢測試劑盒

促甲狀腺su受體(抗原)芽孢桿菌豬轉膠蛋白(TAGLN)elisa定量檢測試劑盒

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微管蛋白(抗原)枯草芽孢桿菌豬內皮蛋白C受體(EPCR)elisa定量檢測試劑盒

質膜微囊蛋白-1抗原金色鏈霉菌豬髓分化因子88(MYD88)elisa定量檢測試劑盒

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組織蛋白meiL抗原淺黃褐蠟傘豬鈣調磷酸酶結合蛋白1(CABIN1)elisa定量檢測試劑盒

成骨特異性轉錄因子(多肽)枯草芽孢桿菌豬成纖維生長因子受體底物2(FRS2)elisa定量檢測試劑盒

CREB結合蛋白抗原云芝栓孔菌(變色栓菌)豬核因子κB受體激活因子配基(RANκL)elisa定量檢測試劑盒

染色盒同源物3抗原球孢白僵菌豬抑制蛋白β1(ARRβ1)elisa定量檢測試劑盒

CBX5(多肽)釀酒酵母豬血小板激活因子ib3(PAFAHIB3)elisa定量檢測試劑盒
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二肽基肽酶VI (DPP6)試劑盒 Anti-KLF8 Antibody馬鈴薯球蛋白(結節性硬化)

組織型纖溶酶原激活因子(tPA)試劑盒Anti-KLF5 Antibody磷酸化馬鈴薯球蛋白(結節性硬化)

谷胱S-轉移酶θ1(GSTθ1/GSTt1)試劑盒Anti-KLF6 Antibody磷酸化馬鈴薯球蛋白(結節性硬化)

補體成分5a(C5a)試劑盒Anti-KLK1 Antibody磷酸化馬鈴薯球蛋白(結節性硬化)

球蛋白G Fc片段(Fcγ)試劑盒 Anti-KLK1 Antibody磷酸化馬鈴薯球蛋白(結節性硬化)

α2(AMY2)試劑盒 Anti-KLK1 Antibody磷酸化馬鈴薯球蛋白(結節性硬化)


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