商品介紹:

特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

測(cè)定步驟：

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。

2、 試劑三的稀釋：將試劑三用蒸餾水稀釋50倍，用多少配多少。（試劑三和蒸餾水1：49稀釋。

3、 工作液配制：在試劑一加入100μl試劑二，充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。（若一次性測(cè)定樣本較少，可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml：0.1ml的比例混勻配制）

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解（溶解后一周內(nèi)用完）。

5、 樣本測(cè)定（在96孔板中依次加入下列試劑）充分混勻，室溫靜置30min后，450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。

注意事項(xiàng)：

待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。

一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢，其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝，以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋；當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時(shí)，宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾，例如0.1mM ascorbic acid，5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色，如果設(shè)置了使用說明中的空白對(duì)照3，就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

優(yōu)點(diǎn)如下：

1、快速簡(jiǎn)便：全程約50分鐘，可測(cè)100例左右樣本。

2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。

5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗(yàn)： X =103.3%。

7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)。

8、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。

磷酸化x激酶A抗體褐黃鱗銹耳MDCK（犬腎）

磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體黑木耳HT-29（人結(jié)腸癌）

磷酸化非受體酪酸蛋白激酶2抗體尖孢鐮孢K-562（人慢性骨髓性白血病）

磷酸化鈣調(diào)節(jié)蛋白-1抗體葡萄座腔菌HCC827（人非小肺癌）

磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體同絲毛殼FaDu（人咽鱗癌）

酪酸酶相關(guān)蛋白2抗體壯麗假絲酵母Hep G2（人肝癌）

TWIST蛋白抗體江西青霉KG-1（人急性骨髓性白血病）

磷酸化羥化酶抗體Pseudoclavibacter caeni SrinivasanL6（大鼠成肌）

拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體土曲霉P3X63Ag8（小鼠骨髓瘤）

腎小管間質(zhì)腎炎抗原抗體尖孢鐮刀菌I型膠原酶（含100mL酶解緩沖液）

跨膜蛋白176A抗體血紅密孔菌3T3-L1（小鼠胚胎成纖維）

跨膜蛋白176A抗體巨獸芽孢桿菌木瓜蛋白酶（含10mL酶解緩沖液）

轉(zhuǎn)錄因子Tbx3抗體哈茨木霉293T（人胚腎）

tinagl1抗體茶樹菇III型膠原酶（含10mL酶解緩沖液）

辣椒素受體5抗體斑玉蕈IV型膠原酶（含10mL酶解緩沖液）
檸檬酸合酶(CS)測(cè)試盒微量法游離血紅蛋白(f-Hb)試劑盒  Anti-CLK2 Antibody蛋白激酶C zeta

Apelin 17(AP17)試劑盒  Anti-CLPP Antibody嗜酸性粒顆粒關(guān)鍵堿性蛋白

膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5 )試劑盒  Anti-CLPX Antibody胰島素原

果糖二磷酸縮酶C(ALDOC)試劑盒 Anti-CLOCK Antibody原蛋白轉(zhuǎn)化酶4

血栓烷受體(TP/TXA2R)試劑盒Anti-CLPB Antibody膜鈣ATP酶1

性結(jié)合球蛋白(SHBG)試劑盒Anti-CLPX Antibody磷酸烯酮酸羧激酶

C4結(jié)合蛋白(C4BP)試劑盒 Anti-CLPX Antibody多聚合酶α