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非洲豬瘟(ASFV)熒光PCR法

參  考  價:2990
具體成交價以合同協議為準
  • 型號

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質

    經銷商

  • 所在地

    上海市

規格

50T 2990元 15盒可售

更新時間:2023-10-31 15:09:41瀏覽次數:114次

聯系我時,請告知來自 儀表網
產地 國產 加工定制
規格 50T 貨號 AP3664
檢測范圍 2×103~1×108copies/mL 用途 僅供科研實驗
非洲豬瘟(ASFV)熒光PCR法低溫運輸不能超過 4 天;開封后避光-20℃儲存,對有效期沒有影響。避免反復凍融,凍融 6 次不影響檢測效果。

非洲豬瘟(ASFV)熒光PCR法【儲存條件及有效期】

1.避光-20℃儲存,有效期 12 個月。

2.低溫運輸不能超過 4 天;開封后避光-20℃儲存,對有效期沒有影響。避免反復凍融,凍融 6 次不影響檢測效果。

3.生產日期、有效期至:見外包裝盒。

【適用儀器】

適用于 ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche480 等全自動熒光PCR 檢測儀。

【樣本要求】

1.樣本種類:鼻/咽拭子、痰液、支氣管肺泡灌洗液;培養物等樣品。

2.保存條件:采集的標本應及時送檢,24 小時內檢測的應 4℃保存,超過 24 小時的最好-70℃保存,并避免反復凍融。

【檢測方法】

1 . 試劑準備(試劑準備區)

將試劑盒各組分置 4℃避光融化,充分混勻后瞬間離心。計算試劑使用份數 N(N=樣本數+1 管陽性對照+1 管陰性對照),根據下表配置反應體系mix,加入一適當體積離心管中,充分混勻后瞬間離心,按 20μL 分裝至 PCR 反應管/板,并轉移至樣本處理區。

4.png

5.png

【結果分析條件設定】:

u 基線(Baseline)設定:應選擇該次實驗指數擴增前所有樣本熒光信號比較穩定的一段區域(所有樣本熒光信號無較大波動),起始點(Start)應避開熒光采集起始階段的信號波動,終止點(End)應比最早出現指數擴增的樣本Ct值減少1~3個循環,建議基線設為6~15。

u 閾值(Threshold)設定:將閾值線設定在剛好超過正常陰性質控品擴增曲線的最高點。

【質控標準】:

1.   陰性質控品的檢測結果應為陰性,無指數擴增期,Ct=40或無Ct;

2.   陽性質控品的檢測結果應為陽性,有明顯的指數擴增期,Ct值應小于等于35;

3.   以上要求需在一次實驗中同時滿足,否則該次實驗視為無效。

【結果判斷】:

1.   陽性:有明顯的指數擴增期,且Ct<38;

2.可疑:有明顯的指數擴增期,且38≤Ct<40,此時樣本為可疑樣本;對于可疑樣本建議復核一次,若復核結果Ct<40且有指數擴增期,則判定為陽性,否則判定為陰性;

3.   陰性:無指數擴增期,Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。

【注意事項】:

             1.PCR 操作各階段應嚴格分區操作,避免交叉污染。

             2.試劑盒各組分使用前應充分融化混勻,離心數秒后使用。

             3.各組分不得與其他產品或不同批號的相應成分進行互換。

             4.待測標本若不及時檢測,應保存于-20℃或-70℃。

             5.樣品的處理應該嚴格按照生物安全規范操作。

             6.PCR 操作人員應具有經驗和受過專業培訓。

             7.本試劑盒僅用于科研使用,不做為臨床診斷使用。

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