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海豚鏈球菌(StI)熒光PCR法

參  考  價:2990
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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    經(jīng)銷商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

50T 2990元 15盒可售

更新時間:2023-10-31 16:04:21瀏覽次數(shù):134次

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產(chǎn)地 國產(chǎn) 加工定制
規(guī)格 50T 貨號 AP3772
檢測范圍 2×103~1×108copies/mL 用途 僅供科研實驗
海豚鏈球菌(StI)熒光PCR法的相關(guān)產(chǎn)品:雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒
鼠嗜粒細胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒
輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒抗原ELISA試劑盒
輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)ELISA試劑盒
輸血傳播病毒(TTV)/辛型肝炎病毒抗體ELISA試劑盒

海豚鏈球菌(StI)熒光PCR法優(yōu)點:①靈敏度高、特異性強。

②時間短,2-3小時出結(jié)果。

③檢測結(jié)果可定量。

④操作簡便。

缺點:①對于已做支原體滅活處理的樣品,由于支原體DNA仍舊存在其中,PCR結(jié)果會出現(xiàn)假陽性。(可用培養(yǎng)法做補充驗證)

②不同廠家生產(chǎn)的試劑盒質(zhì)量差異巨大(由于引物及內(nèi)在設(shè)計不同),需謹(jǐn)慎選擇,盡量在業(yè)人員推薦指導(dǎo)下使用。

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

【質(zhì)量控制】

              1.陰性對照:Ct 值>38 或未檢出。

              2.陽性對照:擴增曲線呈 S 型,且 Ct 值≤30。

              3.同一實驗以上要求需同時滿足,否則本次實驗視為無效。

              4.每種檢測靶標(biāo)都需設(shè)陰陽對照,不同的靶標(biāo)根據(jù)對應(yīng)陰性調(diào)整基線閾值。

【結(jié)果判讀】

              1.FAM 通道檢測 B 組鏈球菌。

              2.陰性:Ct 值>38 或未檢出。

              3.陽性:擴增曲線呈 S 型,且 Ct 值≤35。

              4.可疑:擴增曲線呈 S 型,且 35<Ct 值≤38,需復(fù)檢;復(fù)檢結(jié)果若一致,判定結(jié)果為陽性。

【檢驗方法的局限性】

              1.樣品采集、運輸、保存不當(dāng),試劑運輸、保存、配置不當(dāng)都可能會影響實驗結(jié)果,甚至?xí)?dǎo)致假陰性結(jié)果。

              2.如果實驗室污染、試劑污染、樣品交叉污染,可能出現(xiàn)假陽性結(jié)果。

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