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GV3101 感受態細胞100ul*100多少錢

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廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2019-03-25 11:38:24瀏覽次數:175次

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產地 進口 加工定制
適用領域 科研
GV3101 感受態細胞100ul*100多少錢感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質?;蜻B接產物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。

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分類

GV3101 感受態細胞100ul*100多少錢

100ul*100

表達感受態細胞

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細胞的種類:
*種:
GV3101 感受態細胞100ul*100多少錢是凍存產品,由液氮直接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復蘇手法對于細胞狀態影響較大,一旦細胞狀態不好,很難說是細胞自身不行,還是復蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態影響很大,也不是細胞儲存的方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產品的質量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養基常溫運輸給客戶,排除復蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,進口來源,保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。的凍存是細胞培養的基本操作,不同的實驗室采用的方法略有差異,但是都會遵循慢凍速溶的宗旨。
實驗報告:
一、GV3101 感受態細胞100ul*100多少錢分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗(Abbioscience公司),然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡(Leica公司)下觀察圖像并拍照。
細胞培養操作規程:
一.GV3101 感受態細胞100ul*100多少錢培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
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*  人正常前列腺基質永生化細胞,WPMY-1細胞1 x 10^6 cells/T25培養瓶

*  人支氣管上皮樣細胞,BEAS-2B細胞1 x 10^6 cells/T25培養瓶

*  人主動脈血管平滑肌細胞,HA-VSMC細胞1 x 10^6 cells/T25培養瓶

*  人子細胞,HeLa細胞1 x 10^6 cells/T25培養瓶

*  人子宮頸表皮癌細胞,MS751細胞1 x 10^6 cells/T25培養瓶

*  人子宮頸鱗癌細胞,SiHa細胞1 x 10^6 cells/T25培養瓶

*  人子宮鱗癌細胞(高分化),HCC94細胞1 x 10^6 cells/T25培養瓶

兔Ⅱ型肺泡上皮細胞原代細胞  

兔B淋巴細胞原代細胞 * 

人脈絡叢內皮細胞裂解物   HCPECL 原裝/進口 

人脈絡叢上皮細胞裂解物   HCPEpiCL  

人脈絡叢成纖維細胞裂解物   HCPFL * 

人腦膜細胞裂解物   HMCL 原裝/進口 

人神經細胞裂解物   HNL  

人小腦顆粒細胞裂解物   HCGCL * 
GV3101 感受態細胞100ul*100多少錢三葉因子3檢測試劑盒 規格: 48T/96T

三葉因子3檢測試劑盒 規格: 48T/96T

三基鳥苷合酶1檢測試劑盒 規格: 48T/96T

三合蛋白檢測試劑盒 規格: 48T/96T

三肽基肽酶Ⅰ檢測試劑盒 規格: 48T/96T

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三狀腺原氨檢測試劑盒 規格: 48T/96T

三肌醇檢測試劑盒 規格: 48T/96T

三腺苷檢測試劑盒 規格: 48T/96T

干擾素α檢測試劑盒 規格: 48T/96T

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