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ER2566 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10圖片

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更新時(shí)間:2019-03-25 11:33:34瀏覽次數(shù):200次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
ER2566 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10圖片感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。

購(gòu)買ER2566 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10圖片客戶請(qǐng)先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購(gòu)的ER2566 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10圖片種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。點(diǎn)擊了解更多克隆感受態(tài)細(xì)胞。

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分類

ER2566 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10圖片

100ul*10

表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞

細(xì)胞的種類:
*種:
ER2566 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10圖片是凍存產(chǎn)品,由液氮直接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的方式,快遞時(shí)間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),進(jìn)口來(lái)源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。的凍存是細(xì)胞培養(yǎng)的基本操作,不同的實(shí)驗(yàn)室采用的方法略有差異,但是都會(huì)遵循慢凍速溶的宗旨。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.ER2566 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10圖片培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
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*  人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞,HBMEC細(xì)胞 英文名稱:

*  人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤,U-87 MG細(xì)胞 英文名稱:

*  人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤,U-118MG細(xì)胞 英文名稱:

*  人胚肺成纖維細(xì)胞,HELF細(xì)胞 英文名稱:

*  人胚肺成纖維細(xì)胞,MRC-5細(xì)胞 英文名稱:

*  人胚肺成纖維細(xì)胞,WI-38細(xì)胞 英文名稱:

*  人胚腎上皮包裝細(xì)胞,GP2-293細(xì)胞 英文名稱:

人結(jié)直腸癌氟尿嘧耐藥株,HCT-8/FU細(xì)胞    原裝/進(jìn)口 

人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞,DLD-1細(xì)胞     

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞,COLO320 DM細(xì)胞    * 

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞,COLO320 HSR細(xì)胞    原裝/進(jìn)口 

人前列腺成纖維細(xì)胞,HPFTR細(xì)胞原代細(xì)胞  

人前列腺上皮細(xì)胞,HPECGD細(xì)胞原代細(xì)胞 * 

人前脂肪細(xì)胞,HPTR細(xì)胞原代細(xì)胞 原裝/進(jìn)口 

人韌帶成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞  
ER2566 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10圖片β-乳球蛋白檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

β細(xì)胞素檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

β細(xì)胞素檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

β細(xì)胞素檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

β細(xì)胞素檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

β細(xì)胞素檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

β-骨膠原交聯(lián)檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

β-骨膠原交聯(lián)檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

β-骨膠原交聯(lián)檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

β-促脂素檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、ER2566 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10圖片分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗(Abbioscience公司),然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡(Leica公司)下觀察圖像并拍照。

 

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