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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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GT115 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*5多少錢(qián)

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2019-03-21 16:13:31瀏覽次數(shù):325次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
GT115 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*5多少錢(qián)感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。

細(xì)胞的種類(lèi):
*種:
GT115 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*5多少錢(qián)是凍存產(chǎn)品,由液氮直接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶(hù)。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒(méi)操作好;另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的方式,快遞時(shí)間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過(guò)后,T-25灌滿(mǎn)培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶(hù),排除復(fù)蘇造成影響,常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),進(jìn)口來(lái)源,保證5代以?xún)?nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。的凍存是細(xì)胞培養(yǎng)的基本操作,不同的實(shí)驗(yàn)室采用的方法略有差異,但是都會(huì)遵循慢凍速溶的宗旨。

產(chǎn)品名稱(chēng)

包裝

分類(lèi)

GT115 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*5多少錢(qián)

50ul*5

克隆感受態(tài)細(xì)胞

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、GT115 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*5多少錢(qián)分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗(Abbioscience公司),然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡(Leica公司)下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.GT115 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*5多少錢(qián)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
購(gòu)買(mǎi)GT115 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*5多少錢(qián)客戶(hù)請(qǐng)先與我司細(xì)胞銷(xiāo)售人員核實(shí)訂購(gòu)的GT115 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*5多少錢(qián)種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷(xiāo)售人員索取細(xì)胞說(shuō)明書(shū)并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。點(diǎn)擊了解更多克隆感受態(tài)細(xì)胞。
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*  人心肌細(xì)胞cDNA 英文名稱(chēng):HCM cDNA

*  人心肌細(xì)胞-cDNA 英文名稱(chēng):HCM-a cDNA

*  人心臟成纖維細(xì)胞cDNA 英文名稱(chēng):HCF cDNA

*  人心肌細(xì)胞-心室cDNA 英文名稱(chēng):HCF-av cDNA

*  人心肌細(xì)胞-心房cDNA 英文名稱(chēng):HCF-aa cDNA

*  人角膜上皮細(xì)胞cDNA 英文名稱(chēng):HCEpiC cDNA

*  人角膜細(xì)胞cDNA 英文名稱(chēng):HK cDNA

人表皮黑色素細(xì)胞-中色素   HEM-m * 

人表皮黑色素細(xì)胞-深色素   HEM-d 原裝/進(jìn)口 

人表皮黑色素細(xì)胞-   HEM-a  

人表皮黑色素細(xì)胞-胎兒   HEM-f * 

人真皮成纖維母細(xì)胞-胎兒   HDF-f 原裝/進(jìn)口 

人真皮成纖維母細(xì)胞-新生   HDF-n  

小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞,CT26.WT細(xì)胞 * 

小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞,MC38細(xì)胞 原裝/進(jìn)口 
GT115 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*5多少錢(qián)M-期蛋白8檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

M-期蛋白9檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

NADH脫氫酶1檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

NADH脫氫酶1檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

NADH脫氫酶1檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

NADH脫氫酶2檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

NADH脫氫酶3檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

NADH脫氫酶4檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

NADH脫氫酶5檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

NADH脫氫酶6檢測(cè)試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

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