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上海撫生實業有限公司
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DB3.1 感受態細胞100ul*50包裝

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2019-03-21 15:33:27瀏覽次數:176次

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產地 進口 加工定制
適用領域 科研
DB3.1 感受態細胞100ul*50包裝感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質粒或連接產物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。

購買DB3.1 感受態細胞100ul*50包裝客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的DB3.1 感受態細胞100ul*50包裝種屬、貨號、數量、協商細胞價格并預約發貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。點擊了解更多克隆感受態細胞。

產品名稱

包裝

分類

DB3.1 感受態細胞100ul*50包裝

100ul*50

克隆感受態細胞

細胞的種類:
*種:
DB3.1 感受態細胞100ul*50包裝是凍存產品,由液氮直接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復蘇手法對于細胞狀態影響較大,一旦細胞狀態不好,很難說是細胞自身不行,還是復蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態影響很大,也不是細胞儲存的方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產品的質量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養基常溫運輸給客戶,排除復蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,進口來源,保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。的凍存是細胞培養的基本操作,不同的實驗室采用的方法略有差異,但是都會遵循慢凍速溶的宗旨。
細胞培養操作規程:
一.DB3.1 感受態細胞100ul*50包裝培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
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*  小鼠雪旺細胞 英文名稱:MSC

*  小鼠星形膠質細胞 英文名稱:MA

*  小鼠小腦星形膠質細胞 英文名稱:MA-c

*  小鼠海馬星形膠質細胞 英文名稱:MA-h

*  小鼠小膠質細胞 英文名稱:MM

*  小鼠淋巴成纖維細胞 英文名稱:MLF

*  小鼠腎小管上皮細胞 英文名稱:MREpiC

大鼠腦星形膠質細胞,CTX細胞    * 

大鼠乳癌細胞,MADB106細胞    原裝/進口 

大鼠腎上嗜鉻細胞瘤細胞 低分化,PC12低分化細胞     

大鼠腎上嗜鉻細胞瘤細胞 高分化,PC12高分化細胞    * 

大鼠腎上嗜鉻細胞瘤細胞 未分化,PC12未分化細胞    原裝/進口 

大鼠腎細胞,NRK-52E細胞     

大鼠腎小球系膜細胞,HBZY-1細胞    * 

人骨肉瘤細胞,SJSA-1細胞 原裝/進口 
DB3.1 感受態細胞100ul*50包裝Anoctamin 2蛋白檢測試劑盒 規格: 48T/96T

Anoctamin 3蛋白檢測試劑盒 規格: 48T/96T

Anoctamin 4蛋白檢測試劑盒 規格: 48T/96T

Anoctamin 5蛋白檢測試劑盒 規格: 48T/96T

Anoctamin 6蛋白檢測試劑盒 規格: 48T/96T

Anoctamin 7蛋白檢測試劑盒 規格: 48T/96T

Anoctamin 8蛋白檢測試劑盒 規格: 48T/96T

Anoctamin 9蛋白檢測試劑盒 規格: 48T/96T

Apelin 12蛋白檢測試劑盒 規格: 48T/96T

Apelin 12蛋白檢測試劑盒 規格: 48T/96T
實驗報告:
一、DB3.1 感受態細胞100ul*50包裝分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗(Abbioscience公司),然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡(Leica公司)下觀察圖像并拍照。

 

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