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犬腎細胞

參  考  價:2700
具體成交價以合同協(xié)議為準
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    上海市

規(guī)格

T25培養(yǎng)瓶 2700元 15瓶可售

更新時間:2023-11-17 12:00:10瀏覽次數(shù):220次

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貨號 AXB3252 規(guī)格 T25培養(yǎng)瓶
英文名稱 MDCK(NBL-2)細胞 產(chǎn)品分類 細胞系
犬腎細胞的相關(guān)產(chǎn)品: MES-SA;MESSA MES-SA細胞 MES-SA/Dx5;MESSADx5 MES-SA/Dx5細胞 MES235;MES235 MES235細胞 MEL;MEL MEL細胞 MEG-01細胞 MEG-01人成巨核細胞白血病細胞

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

細胞傳代:

1. 試驗準備:200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌),酒精棉球,廢液缸,試管架,微量移液器,記號筆,培養(yǎng)皿,離心管。

2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基,用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。

3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液,消化 1 分鐘(37℃,5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁,觀察到細胞從壁上脫落下來為止。

4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)。

5. 用 Tip 頭多次吹吸,使細胞分散開。

6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中,1000rpm 離心 5min。

7. 用培養(yǎng)液重懸細胞,細胞計數(shù)后選擇 0.8X106 個細胞加入一個 35mm 培養(yǎng)皿。

8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中,混勻細胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中,使其均勻分布。

9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),第二天轉(zhuǎn)染。

細胞轉(zhuǎn)染:

1. 犬腎細胞轉(zhuǎn)染試劑的準備

① 將 400ul 去核酸酶水加入管中,震蕩 10 秒鐘,溶解脂狀物。

② 震蕩后將試劑放在-20 攝氏度保存,使用前還需震蕩。

2. 選擇合適的混合比例(1:1-1:2/脂質(zhì)體體積:DNA 質(zhì)量)來轉(zhuǎn)染細胞。在一個轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA,震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑,再次震蕩。

5.jpg

8.jpg

細胞培養(yǎng)實驗基本操作:
①進無菌室前要洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長,以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細胞,同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶,開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位,避免直立,以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時盡量不要談話,咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時,應(yīng)專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去,以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面;防止細胞交叉污染:所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細胞遺傳學(xué)方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變,可以復(fù)蘇早期凍存的細胞使用。

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