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貨號	A01X1119	規(guī)格	1×106
英文名稱	A7r5細(xì)胞	產(chǎn)品分類	大鼠細(xì)胞系
實(shí)驗(yàn)類型	DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)+10%FBS+1%L-谷an酰胺+1%P/S	報(bào)告	（鼠源種屬鑒定）

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

名稱	A7r5 (大鼠胸大動脈平滑肌細(xì)胞) (種屬鑒定正確)
別稱	A7R5
種屬	大鼠
年齡（性別）	胚胎
組織來源	胸大動脈平滑肌
生長特性	貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)	成纖維細(xì)胞樣
背景描述	A7r5細(xì)胞培養(yǎng)到穩(wěn)定期后，表現(xiàn)出長高的肌激酶和肌氨酸磷酸激酶活性(CPK)；A7r5細(xì)胞分裂終止后合成骨肉型CPK。
生物安全等級	1
生長培養(yǎng)基	DMEM＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例	1:2-1:4
推薦換液頻率	2~3次/周
凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃
基因表達(dá)情況	myokinase; creatine phosphokinase (muscle isoenzyme); myosin
保藏機(jī)構(gòu)	ATCC; CRL-1444 ECACC; 86050803

細(xì)胞傳代：

1. A7r5大鼠胸大動脈平滑肌細(xì)胞試驗(yàn)準(zhǔn)備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養(yǎng)皿，離心管。

2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。

3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁，觀察到細(xì)胞從壁上脫落下來為止。

4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)。

5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細(xì)胞分散開。

6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。

7. 用培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，細(xì)胞計(jì)數(shù)后選擇 0.8X106 個(gè)細(xì)胞加入一個(gè) 35mm 培養(yǎng)皿。

8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中，混勻細(xì)胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中，使其均勻分布。

9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天轉(zhuǎn)染。

細(xì)胞轉(zhuǎn)染：

1. 轉(zhuǎn)染試劑的準(zhǔn)備

① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。

② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。

2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質(zhì)體體積：DNA 質(zhì)量)來轉(zhuǎn)染細(xì)胞。在一個(gè)轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑，再次震蕩。

6號染色體開放閱讀框28封閉多肽	肺炎克雷伯菌PCR檢測試劑盒
非洲馬瘟病毒RT-PCR試劑盒	干擾suα/β受體2ELISA試劑盒
人彈性蛋白mei(Elastase) ELISA檢測試劑盒	鈣調(diào)寧蛋白1ELISA試劑盒
人11β羥類固醇脫氫mei1型(11β-HSD1)ELISA試劑盒	剪切修復(fù)交叉互補(bǔ)修復(fù)缺陷偶聯(lián)因子1ELISA試劑盒
人套膜蛋白(iNV)試劑盒ELISA	鈣黏蛋白12ELISA試劑盒
人CD73分子(CD73)檢測試劑盒elisa	中心粒外周物質(zhì)1ELISA試劑盒
NOC2家族樣蛋白封閉多肽	生孢梭菌PCR試劑盒
染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白4封閉多肽	馬腺病毒PCR試劑盒
E3泛su蛋白連接meiHECW2封閉多肽	偽結(jié)核棒桿菌PCR試劑盒
粘蛋白/巖藻糖基轉(zhuǎn)移mei3封閉多肽	豬流感(SIV)核suan檢測試劑盒
ECO1蛋白封閉多肽	氣單胞菌通用PCR試劑盒
CD84封閉多肽	A7r5大鼠胸大動脈平滑肌細(xì)胞貓科研PCR檢測試劑盒
SLFN13蛋白封閉多肽	曼氏桿菌通用PCR試劑盒PCR試劑盒
蛋白激meiC亞性D型封閉多肽	普通變形桿菌PCR試劑盒
1號染色體開放閱讀框174封閉多肽	普雷沃菌屬通用PCR檢測試劑盒

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作：
①進(jìn)無菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進(jìn)行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時(shí)間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時(shí)會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時(shí)間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細(xì)胞，同時(shí)塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時(shí)盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時(shí)，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細(xì)胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。