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NR8383大鼠肺泡巨噬細(xì)胞

參  考  價:1800
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    經(jīng)銷商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

1×106 1800元 15瓶可售

更新時間:2023-11-13 15:52:43瀏覽次數(shù):246次

聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)
貨號 A01X1137 規(guī)格 1×106
英文名稱 NR8383細(xì)胞 產(chǎn)品分類 大鼠細(xì)胞系
實驗類型 F12K+15%FBS+1% L-谷an酰胺+1%P/S 報告 (STR鼠源鑒定)報告
NR8383大鼠肺泡巨噬細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品: SU-DHL-16細(xì)胞 SU-DHL-16;SUDHL16 SU-DHL-2人B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞   SU-DHL-2細(xì)胞 SU-DHL-4 細(xì)胞 SU-DHL-4 ;SUDHL4  SU-DHL-4人B淋巴瘤細(xì)胞  SU-DHL-4細(xì)胞 SU-DHL-8 細(xì)胞 SU-DHL-8 ;SUDHL8

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

名稱

NR8383 [AgC11x3A; NR8383.1] (大鼠肺泡巨噬細(xì)胞) (種屬鑒定正確)

別稱

NR-8383; NR 8383; NR8383.1; AgC11x3A; Normal Rat, August 3, 1983

種屬

大鼠

年齡(性別)

不詳

組織來源

肺;巨噬細(xì)胞;肺泡

生長特性

半貼半懸

細(xì)胞形態(tài)

巨噬細(xì)胞樣

背景描述

NR8383細(xì)胞來源于肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細(xì)胞,NR8383細(xì)胞在Gerbil肺細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)液存在下培養(yǎng)了8-9個月。隨后,NR8383細(xì)胞不再需要外源生長因子。通過有限稀釋法,從單個細(xì)胞克隆并亞克隆NR8383細(xì)胞,并3次用軟瓊脂亞克隆。NR8383細(xì)胞表現(xiàn)出巨噬細(xì)胞的特性:吞噬酵母多糖和銅綠、非特異性脂酶活性、Fc受體、氧化降解;分泌IL-1、TNF-β和IL-6,可重復(fù)地響應(yīng)外源生長因子。NR8383細(xì)胞響應(yīng)萊霉素,分泌TNF-β前體。NR8383細(xì)胞在萊霉素刺激下,TNF-β mRNA表達(dá)也上升。NR8383細(xì)胞對內(nèi)毒素敏感,1-10ng/ml的LPS水平抑制增生達(dá)50%。即使達(dá)到0.001mg/ml的水平,LPS抑制還是無毒且在后續(xù)過程中可逆的。NR8383細(xì)胞提供了高響應(yīng)的肺泡巨噬細(xì)胞的均一來源,可以用于體外研究巨響細(xì)胞相關(guān)活性,此細(xì)胞懸浮-貼壁混合生長。

生物安全等級

1

生長培養(yǎng)基

Ham's F-12K+20% FBS+1% P/S

推薦傳代比例

1-4×10^5個/mL

推薦換液頻率

2~3次/周

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO     溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%     溫度:37℃

受體表達(dá)情況

Fc

基因表達(dá)情況

transforming growth factor beta (TGF beta); interleukin 1 (IL-1); interleukin 6 (IL-6)

保藏機構(gòu)

ATCC; CRL-2192

細(xì)胞傳代:

1. 試驗準(zhǔn)備:200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌),酒精棉球,廢液缸,試管架,微量移液器,記號筆,培養(yǎng)皿,離心管。

2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基,用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。

3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液,消化 1 分鐘(37℃,5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁,觀察到細(xì)胞從壁上脫落下來為止。

4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)。

5. 用 Tip 頭多次吹吸,使細(xì)胞分散開。

6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中,1000rpm 離心 5min。

7. 用培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,細(xì)胞計數(shù)后選擇 0.8X106 個細(xì)胞加入一個 35mm 培養(yǎng)皿。

8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中,混勻細(xì)胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中,使其均勻分布。

9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),第二天轉(zhuǎn)染。

3.jpg


細(xì)胞轉(zhuǎn)染:

1. NR8383大鼠肺泡巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑的準(zhǔn)備

① 將 400ul 去核酸酶水加入管中,震蕩 10 秒鐘,溶解脂狀物。

② 震蕩后將試劑放在-20 攝氏度保存,使用前還需震蕩。

2. 選擇合適的混合比例(1:1-1:2/脂質(zhì)體體積:DNA 質(zhì)量)來轉(zhuǎn)染細(xì)胞。在一個轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA,震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑,再次震蕩。
細(xì)胞培養(yǎng)實驗基本操作:
①進(jìn)無菌室前要洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進(jìn)行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長,以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細(xì)胞,同時塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶,開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位,避免直立,以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時盡量不要談話,咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時,應(yīng)專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去,以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面;防止細(xì)胞交叉污染:所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變,可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。

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