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甲羥戊酸激酶抗體說明書

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更新時(shí)間:2020-12-09 15:02:54瀏覽次數(shù):149次

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英文名稱 Anti-MVK

中文名稱 甲羥戊酸激酶抗體

濃 度 1mg/1ml

規(guī) 格 0.2ml/200μg

抗體來(lái)源 Rabbit

克隆類型 polyclonal

交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit

產(chǎn)品類型 一抗 

產(chǎn)品名稱

甲羥戊酸激酶抗體說明書

英文名稱

Anti-MVK

貨號(hào)

FSK6933

別 名 LH receptor mRNA binding protein; LRBP; Mevalonate kinase; Mevalonic aciduria; MK antibody MVLK; KIME_HUMAN.   
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
  a.提取的動(dòng)物 Ig
  b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
  c.青霉素和鏈霉素
  d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
  e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、產(chǎn)品僅用于科研鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
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抗體的鑒定:
1)抗體的效價(jià)鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來(lái)鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力。抗體的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。 
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。抗體親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。
實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。 
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。 
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。 
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。 
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
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甲羥戊酸激酶抗體說明書原花青素Ceruloplasmin peptide  銅藍(lán)蛋白抗原 真核翻譯起始因子3HIgG

異補(bǔ)骨脂素CKLF1  趨化素樣蛋白 細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1IgG

鹽酸小檗堿ART(Artemin)(抗原)   eIF4E結(jié)合蛋白2IgG

23-乙酰澤瀉BAATK peptide  細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)酪氨酸激酶抗原 核酸內(nèi)切酶GIgG

異去甲蟛蜞菊內(nèi)酯AQP-2 (aquaporin Protein-2)  水通道蛋白-2(抗原) 兔抗人、大、小鼠磷酸化細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1IgG

羽扇豆ABCA1(ATP binding cassette transporter A1)  腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗原 真核翻譯起始因子3AIgG

標(biāo)準(zhǔn)品TFPI/LACI  組織因子途徑抑制劑抗體

異鼠李素GLUT12  葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白12 表皮膜蛋白1IgG

原人參三EGFRvIII  表皮生長(zhǎng)因子受體III型突變體抗原 真核翻譯起始因子4GIgG

鹽酸堿CD26  CD26抗原 內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁IgG
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:產(chǎn)品僅用于科研抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。

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