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183次進口elisa試劑盒試驗中須掌握試劑盒的操作技巧
1、保存:ELISA試劑盒中各試劑請按說明書提示合理存放。
在儲存及溫育過程中避免將試劑暴露在強
光中。所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染,否則可能會出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。
2、酶標板:剛開啟的酶標板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。暫時不用的板條應(yīng)拆卸后放入備用鋁箔袋,按推薦溫度存放!
3、加樣:加樣或加試劑時,個孔與zui后一個孔的加樣時間間隔如果太大,將會導致不同的“預(yù)溫育”時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。每次的加樣時間控制在10分鐘內(nèi)。推薦設(shè)置復孔。
4、溫育:為防止樣品蒸發(fā),實驗時必須給酶標板覆膜;洗板后應(yīng)盡快進行下步操作,避免酶標板處于干燥狀態(tài);嚴格遵守給定的溫育時間和溫度。
5、洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在吸水紙上拍干,勿將濾紙直接放入反孔中吸水。在讀數(shù)前要注意清除底部殘留的液體和手指印,以免影響酶標儀讀數(shù)。
6、試劑配制:運輸過程會使液體沾到管壁或瓶蓋,因此使用*0轉(zhuǎn)/分離心1min,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。取用前,請用移液器小心吹打4-5次使溶液混勻。標準品、生物素化抗體工作液、酶結(jié)合物工作液請根據(jù)所需用量配制,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請配制標準品及工作液,盡量不要微量配制以避免由于不準確稀釋而造成濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素化抗體工作液、酶結(jié)合物工作液。若需要分次使用標準品應(yīng)按照每一次用量分裝,將其放在-20~-80°C貯存。避免反復凍融。
7、顯色時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如每隔
5分鐘),如梯度已很明顯,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免顏色過深影響酶標儀讀數(shù)。
8、底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
9、混勻:充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,使用微量振蕩器(使用zui低頻率),如無微量振蕩器,可在反應(yīng)前手工輕輕敲擊酶標板框混勻。
10、安全:試驗中請穿著實驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液樣品時,請按國家生物試驗室安全防護條例執(zhí)行。
11、不同批號的試劑盒組份不能混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)
12、試驗中所用的EP管和吸頭均為一次性使用,嚴禁混用,否則將影響試驗結(jié)果!
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