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112次TSZelisa試劑盒處理和保存方面要考慮以下幾個方面
(1)要注意避免出現嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標記酶的人ELISA檢測試劑盒測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應顯色。
(2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產生分解作用;二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作標記的測定方法產生非特異性干擾。
(3)血清標本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應在-70℃以下。
(4)冰凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復凍融。標本的反復凍融所產生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產生破壞作用,從而引起假陰性結果。此外,人ELISA檢測試劑盒凍融標本的混勻亦應注意,不要進行劇烈振蕩,反復顛倒混勻即可。
(5)標本在保存中如出現細菌污染所致的混濁或絮狀物時,應離心沉淀后取上清檢測。
實驗中的操作要點
1、加樣
在ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結合物,加底物。加樣時應將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產生氣泡。 加標本一般用微量加樣器,按規定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴,以免發生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器,使加液過程迅速完成。
2、標本的采取和保存
可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清自然凝固、收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫學檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA中血漿和血清可同等應用。血清標本可按常規方法采集,應注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質,以HRP為標記的ELISA測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色。
血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應。如在冰箱中保存過久,其中的可發生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。一般說來,在5天內測定的血清標本可放置于4℃,超過一周測定的需低溫冰存。凍結血清融解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強烈振蕩。混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾,澄清后再檢測。反復凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應注意無菌操作,也可加入適當防腐劑。
3、試劑的準備
按Elisa試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA試劑盒ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液應用pH計測量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。
4、保溫
在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應,即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育,有人稱之為孵育,在ELISA中似不恰當。
TSZelisa試劑盒牛布魯氏桿菌抗體(IgM)ELISA Kit 英文名: Bovine brucella antibody(IgM)ELISA kit
牛布魯氏桿菌抗體(IgG)ELISA Kit 英文名: Bovine Brucella antibody IgG ELISA kit
牛補體片斷(C)ELISA Kit 英文名: Bovine complement fragment ,C ELISA kit
牛丙二酸單酰輔酶A(malonyl CoA)ELISA Kit 英文名: Bovine malonyl coenzyme A ELISA kit
牛丙二醛(MDA)ELISA Kit 英文名: Bovine Malondialdehyde,MDA ELISA Kit
牛表皮生長因子(EGF)ELISA Kit 英文名: Bovine Epithelial growth factor,EGF ELISA Kit
牛白三烯B4(LT-B4)ELISA Kit 英文名: Bovine leukotriene B4,LT-B4 ELISA kit
牛白介素8(IL-8)ELISA Kit 英文名: Bovine Interleukin 8,IL-8 ELISA Kit
牛白介素6(IL-6)ELISA Kit 英文名: Bovine Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit
牛白介素5(IL-5)ELISA Kit 英文名: Bovine Interleukin 5,IL-5 ELISA Kit
牛白介素4(IL-4)ELISA Kit 英文名: Bovine interleukin 4,IL-4 ELISA Kit
牛白介素2受體(IL-2R)ELISA Kit 英文名: Bovine Interleukin-2 receptor,IL-2R ELISA kit
牛白介素22(IL22)ELISA Kit 英文名: Bovine interleukin 22,IL22 ELISA kit
牛白介素2(IL-2)ELISA Kit 英文名: Bovine Interleukin 2,IL-2 ELISA Kit
牛白介素1β(IL-1β)ELISA Kit 英文名: Bovine Interleukin 1β,IL- 1β ELISA kit
牛白介素17(IL-17)ELISA Kit 英文名: Bovine Interleukin 17,IL-17 ELISA Kit
牛白介素12(IL-12)ELISA Kit 英文名: Bovine Interleukin 12,IL-12 ELISA Kit
牛白介素10(IL-10)ELISA Kit 英文名: Bovine Interleukin 10,IL-10 ELISA Kit
牛白介素1(IL-1)ELISA Kit 英文名: Bovine Interleukin 1,IL-1 ELISA Kit
牛γ干擾素(IFN-γ)ELISA Kit 英文名: Bovine Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit
牛γ氨基丁酸(GABA)ELISA Kit 英文名: Bovine Gamma-aminobutyric acid,GABA ELISA Kit
牛β-乳球蛋白(β-LG)(過敏原Bosd5)(LGB)ELISA Kit 英文名: Bovine beta-lactoglobulin(Beta-LG)(allergen Bosd5)(LGB)ELISA kit
牛β羥基丁酸脫氫酶(β-HBDH)ELISA Kit 英文名: Bovine β-Hydroxybutyrate Dehydrogenase,β-HBDH ELISA Kit
牛β羥丁酸(βOHB)ELISA Kit 英文名: Bovine Beta-Hydroxybutyric Acid,β-OHB ELISA KitTSZelisa試劑盒
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