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大鼠多酚氧化酶ELISA試劑盒使用說明書

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大鼠多酚氧化酶ELISA試劑盒標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
8.0 U/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液

4.0 U/L 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

2.0 U/L 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

1.0 U/L 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

0.5 U/L 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此重復5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 大鼠多酚氧化酶ELISA試劑盒測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后15 分鐘以內進行。
遺傳霉素 (G418) 干粉    100mg    非凍型組織 RNA 保存液    250mL
潮霉素 B 干粉    250mg    非凍型血液 RNA 保存液    10mL
甲酰胺,PCR 級    5mL    非凍型血液 RNA 保存液    100mL
嘌呤霉素干粉    25mg    冷凍型血液 RNA 保存液    100mL
β- 巰基乙醇,電泳級    1.5mL    非凍型細菌 RNA 保存液    100mL
   非凍型細菌 RNA 保存液    250mL
PCR 優化試劑盒    1套    非凍型拭子病毒保存液    100mL
   病毒沉淀劑    100mL
    水樣病毒沉淀劑    10 次
電泳級丙烯酰胺溶液 ( 干粉型 )    200mL    動物 RNAout(TRIzol)     100mL
   動物 RNAout(TRIzol)     250mL
SDS-PAGE 濃縮膠配膠液    500mL    柱式動物 RNAout    50 次
SDS-PAGE 分離膠配膠液    500mL    柱式動物 RNAout    250 次
電泳級尿素    100g    大提柱式動物 RNAout    5次
DNA 尿素 -PAGE 上樣液    1.5mL    柱式動物 RNA-DNA 雙提試劑盒    50 次
DNA 尿素 -PAGE 上樣液    10mL    血液 RNAout     50 次
大鼠多酚氧化酶ELISA試劑盒

 

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