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細胞培養基種類與基本成分
培養基種類
經典的培養基有很多種,其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應用泛的培養基。其他如M199、IMDM、L15培養基等也用于某些細胞的培養。
其具體的特征及應用如下:
1、BME細胞培養基基礎Eagle培養基(Basal Medium Eagle),1955年Eagle設計,BSS+12種氨
基酸+谷氨酰胺+8種維生素。簡單、便于添加,適于各種傳代細胞系和特殊研究用,在此基礎上改良的細胞培養基品種有MEM、DME、IMDM等。
2、MEM細胞培養基又稱*Eagle培養基(Minimal Essential Medium),1959年在Eagle's基礎培養基(BME)上修改而來,刪去賴氨酸、生物素,氨基酸濃度增加,適合多種細胞單層生長,有可高壓滅菌品種,是一種基本、試用范圍培養基,但因其營養成分所限,針對之特定細胞培養與表達時,并不一定是使用效果培養基。
3、DMEM細胞培養基DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培養基,起初是為小鼠成纖維細胞設計的。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L,后來為了某些細胞的生長需要,將葡萄糖含量又調整為4500 mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了。低糖適于依賴性貼壁細胞培養,特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養。高糖更適合高密度懸浮細胞培養,也適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養,也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞的培養。例如CHO細胞表達乙肝疫苗、CHO細胞表達EPO。
4、IMDM細胞培養基Guilber和Iscove將Dulbecco' Medium改良為Iscove's Medium,用于培養紅細胞和巨噬細胞前體。此種培養液含有硒、額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉和HEPES。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進小鼠B淋巴細胞,LPS
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