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細胞培養基概念和原理:
細胞培養基基是人工模擬細胞在體內生長的營養環境,是提供細胞營養和促進細胞生長增殖的物質基礎。培養液或培養基的含義幾乎相同,英文都是medium。當它是粉劑時,傾向性地稱為培養基,而將粉劑配成液體后,多稱為培養液。培養液中常常補加血清、抗生素等成分。培養基主要包括天然細胞培養基、合成細胞培養基和無血清細胞培養基等。天然細胞培養基是人們早期采用的細胞培養基,直接取自于動物組織提取液或體液,如血漿凝塊、血清、淋巴液、胚胎浸出液等。營養價值高,但成分復雜,差異大、不穩定,來源也受到限制。水解乳蛋白和膠原是兩種較好的天然培養基,富含氨基酸。血清是天然培養基中效和的培養基,但其組成成分復雜,其中一些成分與功能不明確。血清的來源有胎牛血清、小牛或成牛血清、馬血清、雞血清、羊血清及人血清,泛應用的為胎牛血清和小牛血清。
細胞培養基基是用化學成分明確的試劑配制的培養基,組分穩定,主要包括糖類、必需氨基酸、維生素、無機鹽類等。自1950 年199 細胞培養基問世以來,合成細胞培養基發展至今已有幾十種,除了沿用半個世紀的基礎合成細胞培養基之外,近年來還出現了營養成分更加豐富的低血清細胞培養基。
細胞培養基組成及作用:
折疊氨基酸
組成蛋白質的基本單位。不同種類的細胞對氨基酸的要求各異,但有幾種氨基酸細胞自身不能合成,必須依靠培養液提供,這幾種氨基酸稱為必需氨基酸。其中谷氨酰胺是細胞合成核酸和蛋白質必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡 。
必需氨基酸包括L-谷氨酰胺、L-組氨酸、L-異亮氨酸、L-亮氨酸、L-賴氨酸、L-蛋氨酸、L-苯丙氨酸、L-蘇氨酸、L-色氨酸、L-纈氨酸等。
折疊維生素
維持細胞生長的生物活性物質,在細胞代謝中起調節及控制作用。在細胞培養中,盡管血清是維生素重要來源,但是許多培養基中添加了各種維生素以適合更多的細胞系生長。
脂溶性維生素如:A、D、E、K。
水溶性維生素如:B1、B2、B6、B12、泛酸、葉酸、生物素、C、煙酰胺等。
許多維生素參與構成各種酶的活性基團的成分,沒有它們,酶便沒有活性,代謝活動將無法進行。
VA是細胞合成糖蛋白時寡糖基的載體,對上皮細胞有重要的維護作用。VD參與調節鈣的吸收。VE是抗氧劑,可防止組成生物膜的磷脂中不飽和脂肪酸被氧化。VK缺乏會引起低凝血酶原及凝血時間延長。
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