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上海滬峰生物科技有限公司
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實驗過程中酶標比色儀的使用

時間:2015/5/25閱讀:338
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 酶標比色儀簡稱酶標儀,通常指于測讀ELISA結果吸光度的光度計。針對固相載體形式的不同,各有特制的適用于板、珠和小試管的設計。許多試劑公司配套供應酶標儀。酶標儀的主要性能指標有:測讀速度、讀數的準確性、重復性、度和可測范圍、線性等等。優良的酶標儀的讀數一般可到0.001,準確性為±1%,重復性達0.5%。舉例說,若某孔測得的A值為1.083,則該孔相對于空氣的真實A值應為1.083±0.011.0731.093),重復測定數次,其A值均應1.083±0.051.0781.088)在之間。酶標儀的可測范圍視各酶標儀的性能而不同。普通的酶標儀在0.0002.000,新型號的酶標儀上限拓寬達2.900,甚至更高。超出可測上限的A值常以"*""over"或其它符號表示。應注意可測范圍與線性范圍的不同,線性范圍常小于可測范圍,比如某一酶標儀的可測范圍為0.0002.900,而其線性范圍僅0.0002.000,這在定量ELISA中制作標準曲線時應予注意。

    酶標儀不應安置在陽光或強光照射下,操作時室溫宜在1530,使用前先預熱儀器15-30分鐘,測讀結果更穩定。

測讀A值時,要選用產物的敏感吸收峰,如OPD492nm波長。有的酶標儀可用雙波長式測讀,即每孔先后測讀兩次,*次在zui適波長(W1),第二次在不敏感波長(W2),兩次測定間不移動ELISA板的位置。例如OPD492nmW1630nmW2,zui終測得的A值為兩者之差(W1-W2)。雙波長式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

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