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大腸桿菌顯色培養基的配制與滅菌:
1目的:
1.1了解并掌握培養基的配制、分裝方法
1.2掌握各種實驗室滅菌方法及技術。
2原理:
培養基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養料。由于微生物具有不同的營養類型,對營養物質的要求也各不相同,加之實驗和研究的目的不同,所以培養基的種類很多,使用的原料也各有差異,但從營養角度分析,培養基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、無機鹽、生長素以及水分等。另外,培養基還應具有適宜的pH值、一定的緩沖能力、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓。
瓊脂是從石花菜等海藻中提取的膠體物質,是應用zui廣的凝固劑。加瓊脂制成的培養基在98~100℃下融化,于45℃以下凝固。但多次反復融化,其凝固性降低。
任何一種培養基一經制成就應及時*滅菌,以備純培養用。一般培養基的滅菌采用高壓蒸汽滅菌。
3材料:
3.1器皿及材料
天平、稱量紙、牛角匙、精密pH試紙、量筒、刻度搪瓷杯、試管、三角瓶、漏斗、分裝架、移液管及移液管筒、培養皿及培養皿盒、玻璃棒、燒杯、試管架、鐵絲筐、剪刀、酒精燈、棉花、線繩、牛皮紙或報紙、紗布、乳膠管、電爐、滅菌鍋、干燥箱。
3.2藥品試劑
蛋白胨、牛肉膏、NaCl、K2HPO4、瓊脂、NaNO3、KCl、MgSO4、FeSO4、蔗糖、麥芽糖、木糖、葡萄糖、半乳糖、乳糖、土豆汁、豆芽計、磷酸銨、5%NaOH溶液、5%HCl溶液。
4流程:
稱藥品→溶解→調pH值→融化瓊脂→過濾分裝→包扎標記→滅菌→擺斜面或倒平板。
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