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人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2(GSK2)ELISA試劑盒

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測(cè)定方法是以抗原和抗體分子為測(cè)定靶標(biāo)的方法,亦是目前zui為常用的實(shí)驗(yàn)室診斷方法之一。
從理論上說(shuō),一種生物或生理活性物質(zhì),只要有辦法得到其特異的抗體,就可以建立這種物質(zhì)的酶聯(lián)免疫測(cè)定方法。在以前看來(lái)一些難以進(jìn)行質(zhì)量測(cè)定的微量生物活性物質(zhì),如受體、細(xì)胞因子以及酶等均可使用酶聯(lián)免疫測(cè)定技術(shù)來(lái)測(cè)定。酶聯(lián)免疫測(cè)定方法是以抗原抗體間的特異反應(yīng)為基礎(chǔ)的,其與生化的化學(xué)反應(yīng)有著本質(zhì)的區(qū)別,并且由于標(biāo)記物如同位素、酶、熒光素、微量元素、發(fā)光物質(zhì)等的摻人,酶聯(lián)免疫測(cè)定技術(shù)從低靈敏的免疫沉淀和免疫凝集反應(yīng)進(jìn)入到了高靈敏的放射免疫、酶免疫、熒光免疫和發(fā)光免疫測(cè)定時(shí)代,可見酶聯(lián)免疫測(cè)定更多的是用于生物活性物質(zhì)的微量測(cè)定。
目前在上,很多重要的疾病診斷標(biāo)志物均使用酶聯(lián)免疫測(cè)定方法來(lái)檢測(cè),如抗HAV IgM,乙肝“兩對(duì)半”、抗HCV,抗HIV,梅毒抗體、優(yōu)生優(yōu)育TORCH系列、性病病原體的抗原或抗體等傳染性病原體血清標(biāo)志物、激素、腫瘤標(biāo)志物、自身抗體、特種蛋白、細(xì)胞因子和治療藥物以及HBVDNA,HCV-RNA,遺傳病基因、腫瘤基因、基因突變等,這些標(biāo)志物的檢測(cè)質(zhì)量直接關(guān)系到患者的診斷和治療。
而在血站,HBsAg,抗HCV,抗HIV和梅毒抗體等標(biāo)志物的檢測(cè),哪怕是1%的錯(cuò)誤,對(duì)將要接受輸血的特定患者來(lái)說(shuō),就是100%的災(zāi)難。近期,在電視、報(bào)紙等新聞媒體中,常可見到一些有關(guān)醫(yī)患糾紛的報(bào)道,其中一些就與酶聯(lián)免疫測(cè)定有關(guān),如輸血后丙肝病毒、艾滋病毒感染的發(fā)生,性病檢測(cè)的假陽(yáng)性等。可見,酶聯(lián)免疫測(cè)定的質(zhì)量控制有多么重要。
ELISA試劑盒檢測(cè)中樣品的處理
1.細(xì)胞培養(yǎng)物上清:
細(xì)胞培養(yǎng)物于室溫1000g,離心10分鐘后收集上清,并將標(biāo)本保存于-20℃,且應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.血清:
標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000g,4℃離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.血漿:
可用EDTA或肝素作為抗凝劑標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃,1000g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
4.尿液:
無(wú)菌收集取初尿,離心除去沉淀物,即可用于檢測(cè),要*保存尿樣,可以加入0.05%的NaN3在4-8℃保存,或加入尿樣冰凍保護(hù)液放入-20℃冰箱*保存。
5.組織勻漿:
將組織標(biāo)本先用PBS洗滌,除去多余血液,勻漿化后放在PBS于-20℃放置過(guò)夜,再經(jīng)過(guò)二次反復(fù)凍融破膜,5000g,4℃離心5分鐘,取上清即可檢測(cè)。
注:取樣和樣品處理過(guò)程中,防止有毒物質(zhì)對(duì)操作人員的危害,要采取相應(yīng)的保護(hù)措施。
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