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NADKNAD激酶檢測試劑盒微量法

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產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-11 09:02:16瀏覽次數:614次

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貨號 FS-01S63212
NADKNAD激酶檢測試劑盒微量法公司正在出售的產品:氰化高鐵血紅蛋白參比液(150g/L)透射電鏡(TEM)環氧樹脂組織包埋試劑盒
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公司產品僅用于科研提供的生化試劑盒,質量信得過產品,售后完善。服務于高校及免疫學科研單位,竭誠為您提供更周到的服務更優質的產品。

產品名稱:NADKNAD激酶檢測試劑盒微量法

規格:100/48

檢測方法:微量法

貨號:FS-01S63212
商品介紹:

測定意義

NADK(EC 2.7.1.23)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是目前所發現的生物體內惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)以ATP或無機多聚磷酸[poly(P)]作為磷酰基供體進行磷酸化反應,生成NADP(H)。因此,NAD激酶在合成NADP(H)以及調節NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。

測定原理:

NADK催化NAD+磷酸化,生成NADP+;NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH;NADPH通過PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(MTT),通過在600 nm下測定MTT的還原速度(吸光值的變化)可反映出NADK活性的大小。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
QQ截圖20220307153604.png

粗酶液提取:

1、細胞或組織樣品的制備:

培養細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數量(104個):提取液體積(ml)為500~10001的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

組織因子途徑抑制因子(TFPI)聯免疫試劑盒梨形卷枝霉CaMKII-α (D10C11) Rabbit mAb

血栓調節蛋白(TM)聯免疫試劑盒假絲酵母屬TNF-α (D2D4) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific)

補體因子4 (C4)聯免疫試劑盒鼠李糖小短桿TNF-α (D2D4) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific)

鐵蛋白(FE)聯免疫試劑盒釀酒酵母SimpleChIP® Human CDKN1B Promoter Primers

球蛋白G(IgG)聯免疫試劑盒分枝桿SimpleChIP® Human EGR1 Intron 3 Primers

血清轉鐵蛋白(TF)聯免疫試劑盒蒙古口蘑DLST (D22B1) XP® Rabbit mAb

卵泡抑樣蛋白1(FSTL1)聯免疫試劑盒產氣莢膜梭 CDLST (D22B1) XP® Rabbit mAb

賴酰氧化(LOX)聯免疫試劑盒 鏈霉SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb

絨毛膜促性腺(CG)聯免疫試劑盒凍土毛霉ADAP Antibody

生長(GH)聯免疫試劑盒樟疫霉PhosphoPlus® Smad2 (Ser465/467) Antibody Duet

IV型膠原(COL4)聯免疫試劑盒印度芽孢桿MAML1 (D3E9) Rabbit mAb

纖維連接蛋白(FN)聯免疫試劑盒釀酒酵母Phospho-Stat3 (Tyr705) Blocking Peptide

白介9(IL-9)聯免疫試劑盒斑玉蕈Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate)

I型前膠原(PCI)聯免疫試劑盒木蹄層孔Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb (APC Conjugate)

III型前膠原(PCIII)聯免疫試劑盒枯草芽孢桿枯草亞種XPD (D3Z6I) Rabbit mAb
NADKNAD激酶檢測試劑盒微量法陰離子轉運蛋白-1(人源)Anti-GAST Antibody大鼠白介12 p40IL-12/p40elisa定量檢測試劑盒

陰離子轉運蛋白-1(大、小鼠同源:人源見bs-0606PAnti-GATA5 Antibody豚鼠糖蛋白130gp130elisa定量檢測試劑盒

陰離子轉運蛋白-3(抗原)Anti-GBA3 Antibody豚鼠三葉因子2TFF2elisa定量檢測試劑盒

半乳糖凝集9(抗原)Anti-GAS41 Antibody豚鼠性磷(ALPelisa定量檢測試劑盒

胚胎干關鍵蛋白(多肽)Anti-GCFC2 Antibody豚鼠信號3B SEMA3Belisa定量檢測試劑盒

骨橋蛋白(抗原)Anti-GCHFR Antibody豚鼠纖溶原激活物抑制因子1PAI1elisa定量檢測試劑盒

抑癌基因p16(抗原)Anti-GBP4 Antibody大鼠骨成型蛋白4BMP-4elisa定量檢測試劑盒

p21 核分裂抑制因子之一(抗原)Anti-GBP3 Antibody豚鼠甲狀腺球蛋白(TGelisa定量檢測試劑盒

 

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