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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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細(xì)胞凋亡DNA Ladder提取試劑盒(柱式吸附)

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-09 09:30:17瀏覽次數(shù):426次

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貨號(hào) FS-X9526
細(xì)胞凋亡DNA Ladder提取試劑盒(柱式吸附)公司正在出售的產(chǎn)品:木質(zhì)素過氧化物酶(LiP)測(cè)試盒 規(guī)格:100管/96樣 測(cè)試方法:微量法
N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)測(cè)試盒 規(guī)格:50管/24樣 測(cè)試方法:可見分光光度法
抗壞血酸(AsA)/維生素含量測(cè)試盒 規(guī)格:50管/48樣 測(cè)試方法:滴定法
甘油三酯(TG)含量測(cè)試盒 規(guī)格:100管/96樣 測(cè)試方法:微量法

產(chǎn)品介紹:

本試劑盒是目前先進(jìn)的DNA Ladder抽提試劑盒之一。本試劑盒是針對(duì)細(xì)胞凋亡過程中產(chǎn)生的核小體間DNA鏈斷裂而設(shè)計(jì)的。可以非常有效地抽提小片段為180-200bp的DNA ladder,同時(shí)又可以抽提到大50kb左右的基因組DNA。本試劑盒可以抽提50個(gè)樣品。

DNA ladder也稱DNA fragmentation,是細(xì)胞凋亡的一個(gè)重要指標(biāo)。通常觀察到DNA ladder,就可以判定細(xì)胞發(fā)生了凋亡。

樣品首先被蛋白酶K消化,隨后加入適合DNA結(jié)合到純化柱上的緩沖液,然后加入到純化柱內(nèi)。通過高速離心,使DNA在穿過純化柱的瞬間,結(jié)合到純化柱上,隨后通過兩次洗滌去除各種雜質(zhì),后通過洗脫液把DNA洗脫下來。整個(gè)過程無需酚抽提,無需酒精沉淀,樣品裂解后僅需約15分鐘即可完成。

通過DNA純化柱方式抽提DNA ladder比用傳統(tǒng)的酚抽提酒精沉淀方法更加便捷,小片段DNA不容易損失。試劑盒提供了RNase A,可以獲得不含RNA的高純度總DNA,排除了RNA對(duì)DNA ladder觀察造成的干擾。

本試劑盒每次多可以抽提20mg組織或200-350萬個(gè)培養(yǎng)細(xì)胞。樣品用量過多,反而會(huì)影響抽提效果。純化柱對(duì)于DNA的大容量約為30微克。通常每200萬Hela細(xì)胞或500萬淋巴細(xì)胞可以抽提得到15-25微克總DNA,每25mg肝、腦、腎組織可以抽提得到10-30微克總DNA,每25毫克心、肺組織可以抽提得到5-10微克總DNA,每10mg脾組織可以抽提得到5-30微克總DNA。樣品的用量請(qǐng)勿超過純化柱的容量,樣品用量好能保持在純化柱容量的70%或以下。當(dāng)然過少的樣品也不利于檢測(cè)到DNA ladder。

對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞的凋亡檢測(cè),通常6孔板一個(gè)孔的細(xì)胞就足夠用于DNA ladder的抽提和檢測(cè)。

試劑盒組份:

樣品裂解液A——————10ml

樣品裂解液B——————11ml

洗滌液I——————21ml(第一次使用前加入7ml無水乙醇)

洗滌液II——————16ml (第一次使用前加入24ml無水乙醇)

洗脫液——————22ml

蛋白酶K——————1.1ml

RNase A——————220μl

DNA純化柱及廢液收集管——————50套

儲(chǔ)存條件:室溫,有效期一年。( 蛋白酶K需-20℃保存)

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

產(chǎn)品貨號(hào)

細(xì)胞凋亡DNA Ladder提取試劑盒(柱式吸附)

DNA Ladder Extraction Kit with Spin Column

50次

FS-X9526


注意事項(xiàng):

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

操作步驟:

1、貼壁細(xì)胞的消化

①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。

②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。

③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

氨酸脫氫酶2(PRODH2)檢測(cè)試劑盒  forProlineDehydrogenase2(PRODH2)    

鱷失調(diào)蛋白(ATCAY)檢測(cè)試劑盒  forCaymanAtaxia(ATCAY)    

基質(zhì)金屬蛋白酶8(MMP8)檢測(cè)試劑盒  forMatrixMetalloproteinase8(MMP8)    

纖維蛋白肽A(FPA)檢測(cè)試劑盒  forFibrinopeptideA(FPA)    

纖維蛋白原相關(guān)蛋白1(FGL1)檢測(cè)試劑盒  forFibrinogenLikeProtein1(FGL1)    

生長(zhǎng)分化因子2(GDF2)檢測(cè)試劑盒  forGrowthDifferentiationFactor2(GDF2)    

泛醌蛋白4(UBQLN4)檢測(cè)試劑盒  forUbiquilin4(UBQLN4)    

蛋白激酶Cε(PKCε)檢測(cè)試劑盒  forProteinKinaseCEpsilon(PKCe)    

矢車菊苷β6(CENTβ6)檢測(cè)試劑盒  forCentaurinBeta6(CENTb6)    

Calicin蛋白(CCIN)檢測(cè)試劑盒  forCalicin(CCIN)    

TGFβ誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1(TIEG1)檢測(cè)試劑盒  forTGFBetaInducibleEarlyResponseGene1(TIEG1)    

組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)檢測(cè)試劑盒  forTissueInhibitorsOfMetalloproteinase2(TIMP2)    

白介素31(IL31)檢測(cè)試劑盒  forInterleukin31(IL31)    

線粒體甘油-3-磷酸酰基轉(zhuǎn)移酶(GPAM)檢測(cè)試劑盒  forGlycerol-3-PhosphateAcyltransferase,Mitochondrial(GPAM)    

甘胺酸-N-甲基轉(zhuǎn)移酶(GNMT)檢測(cè)試劑盒  forGlycine-N-Methyltransferase(GNMT)    

胱天蛋白酶8(P8)檢測(cè)試劑盒  forCaspase8(P8)    

和肽素(CPP)檢測(cè)試劑盒  forCopeptin(CPP)    
細(xì)胞凋亡DNA Ladder提取試劑盒(柱式吸附)來酸溴苯那敏標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:125mg  英文名稱:Brompheniramine Maleate

S-腺苷-L-高半氨酸標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:50mg  英文名稱:S-Adenosyl-L-Homocysteine

托拉唑相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:20mg  英文名稱:

戊酸雌二醇標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:100mg  英文名稱:Estradiol Valerate

二硫化四乙基秋蘭姆標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱:Disulfiram

內(nèi)酯相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:100mg  英文名稱:

囊素標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱:Allantoin

芐星頭孢匹林標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:100mg  英文名稱:Cephapirin Benzathine

蒼白松果菊標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:1g  英文名稱:

吡酯標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:150mg  英文名稱:Topiramate



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