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Smo receptor激動劑(SAG)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-18 15:04:21瀏覽次數:186次

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貨號 FS-X10494
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中文名稱:Smo receptor激動劑(SAG)

英文名稱:SAG

產品規格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg

貨號:FS-X10494

產品介紹:

英文名稱:SAG

產品規格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg

SAG是一種有效的Smo receptor激動劑,能夠活化Hedgehog信號通路,Kd值為59nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:912545-86-9

純度:99.61%

分子量:490.06

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

 ATCC 102245-羥色轉運蛋白抗體Anti-GALE Antibody小核糖核蛋白多肽D1(SNRPD1)

大腸埃希菌鏈霉抗體Anti-GALT Antibody小核糖核蛋白多肽C(SNRPC)

香茅彎孢磷化SH2結構域轉化蛋白1抗體Anti-GALNS Antibody小根蛋白(ROLT)

蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種DNA結合蛋白2抗體Anti-GAP43 Antibody小泛相關修飾蛋白2(SUMO2)

分枝節桿菌轉錄因子蛋白SIM2抗體Anti-GAP43 Antibody小白蛋白(PVALB)

鼠傷門氏菌 TA97a膜內蛋白4抗體Anti-GAP43 Antibody硝基酪(NT)

黃桿菌絲裂原活化蛋白激磷p38γ抗體Anti-GAP43 Antibody腺磷核糖轉移(APRT)

墻壁圣格奧爾根菌磷化絲裂原活化蛋白激磷p38γ抗體Anti-GATA2 Antibody腺瘤息肉病大腸桿菌蛋白(APC)

枯草芽孢桿菌尿轉運型糖蛋白A2抗體Anti-GAS6 Antibody腺激8(AK8)

鐘器腐霉可溶性載質轉運蛋白3A1抗體Anti-GATA1 Antibody腺激7(AK7)

膿腫分枝桿菌含氧轉移2A抗體Anti-GATA2 Antibody腺激5(AK5)

小青霉腸炎沙門氏菌抗體Anti-GATA4 Antibody腺激4(AK4)

藍綠青霉SEC14樣蛋白2抗體Anti-GATA3 Antibody腺激3(AK3)

佛雷德里克斯堡假單胞菌跨膜蛋白SEMA4D抗體Anti-GATA5 Antibody腺激2(AK2)

Sphingopyxis rigui 抑癌蛋白5抗體Anti-GATA5 Antibody腺激1(AK1)

多座蟲草*基底膜相關軟骨蛋白多糖抗體Anti-GATA3 Antibody腺環化關聯蛋白2(CAP2)

絲蛋白抑制劑A11抗體銀耳人呼吸道上皮細胞

神經突出相關蛋白Slitrk1抗體朗比可假絲酵母人肺大動脈平滑肌細胞

骨形態發生抑制蛋白SOST抗體鶴羽田戴爾福特菌人肺大動脈內皮細胞

24脫氫膽固還原抗體紫紅曲人肺動脈成纖維細胞
Smo receptor激動劑(SAG)黃銹傘 納氮化鋁皮質酮;腎上腺酮

赭色擲孢酵母 Boc-L-谷-1-叔丁酯糖皮質

竹針孢座囊 4--L-苯Ca-ATP

釀酒酵母 L-4-溴苯Na-K-ATP

耐冷冷桿 5--2-羧膽固

棲稻黃色單胞 N-甲基二烯基活化B

釀酒酵母 4-(溴甲基)甲酯酪蛋白

無環田頭菇 乙鎂腫瘤壞死因子α

煙色擬盤多毛孢 3,5-二芐氧基苯甲膽固7α羥化

球孢白僵 2,3,5-三氟苯甲固膽固轉運蛋白

八孢裂殖酵母 雙(p-甲苯基)氧化磷低密度脂蛋白

弗雷德里克斯堡假單胞 5-氟-2-三氟甲唾液

華根霉 3-溴-1,8-萘二甲酐蛋白A

多黏類芽孢桿 (1R,2R,5R)-(+)-2-羥基-3-蒎酮乳

弗蘭克氏 2 - 二苯基膦-2' - (N組,n -二基) - 聯苯尿氮

 


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