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Aurora A和Aurora B抑制劑(ZM447439)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-23 14:49:42瀏覽次數(shù):190次

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貨號 FS-X10826
Aurora A和Aurora B抑制劑(ZM447439)正在熱銷的產(chǎn)品:eNOS(Human Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit 人內(nèi)皮型一氧化氮合成CBZ-D-谷氨α-芐酯 98%
HO-1(Human heme oxygenase 1) ELISA Kit 人血紅氧合1 98%
iNOS(Human inducible nitric

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱:Aurora A和Aurora B抑制劑(ZM447439)

英文名稱:ZM-447439

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

貨號:FS-X10826

產(chǎn)品介紹:

ZM447439是ATP競爭性Aurora A和B選擇性抑制劑,IC50分別為110nM和130nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:331771-20-1

純度:98.88%

分子量:513.59

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

產(chǎn)短桿菌人凋亡相關(guān)因子配體Anti-OR5AU1 Antibody人α烯化(αENOL)

根瘤菌大鼠原激活肽Anti-OR5AU1 Antibody人α烯化(αENOL)

白布勒擔孢酵母大鼠補體因子HAnti-OR5B12 Antibody人膠原II(Collagenase II)

產(chǎn)氣腸桿菌人凋亡相關(guān)因子Anti-OR5B3 Antibody人膠原II(Collagenase II)

放射桿狀根瘤菌小鼠CD8分子Anti-OR5F1 Antibody人膠原I(Collagenase I)

果生鏈核盤菌人E選擇Anti-OR5H1 Antibody人膠原I(Collagenase I)

解淀粉芽孢桿菌植物亞種大鼠膀胱腫瘤抗原Anti-OR5D13 Antibody人磷化蛋白激C(P-PKC)

大腸桿菌小鼠CD25分子Anti-OR5D16 Antibody人磷化蛋白激C(P-PKC)

豬鏈球菌人嗜粒趨化蛋白Anti-OR5H15 Antibody人磷化外信號調(diào)節(jié)激(pERK)

假單胞菌小鼠CD20分子Anti-OR5H15 Antibody人磷化外信號調(diào)節(jié)激(pERK)

橡膠疫霉大鼠血小板衍生生長因子BBAnti-OR5H6 Antibody人磷化外信號調(diào)節(jié)激(pERK)

地衣芽孢桿菌小鼠CD14分子Anti-OR5I1 Antibody人磷化外信號調(diào)節(jié)激(pERK)

克魯維尼爾巴克利酵母大鼠胃蛋白Anti-OR5K1 Antibody人乙酰酯(AChE)

非洲黑蛋巢人鼠嗜粒趨化因子Anti-OR5M1 Antibody人乙酰酯(AChE)

南類芽孢桿菌小鼠神經(jīng)生長因子Anti-OR5L1 Antibody人葡萄糖氧化(GOD)

大腸埃希氏桿菌人內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子Anti-OR5M1 Antibody人葡萄糖氧化(GOD)

乳腺癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗體豬屎豆根瘤菌人腎上腺皮質(zhì)小細胞癌細胞

染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體#姬菇人甲狀腺癌細胞ACT-1(干細胞庫保藏)

受體結(jié)合絲蘇激2抗體黃硬皮馬勃人低分化肺腺癌細胞

孤兒核受體抗體#桑葉刺盤孢人耐VP16絨癌細胞株
Aurora A和Aurora B抑制劑(ZM447439)黃紅菇 豬丹(疫苗)培養(yǎng)基磷脂

沙漠奇異球 豬丹培養(yǎng)基(不含吐溫)孕酮

柱彎孢 改良frey氏培養(yǎng)基睪酮

金針菇 B5培養(yǎng)基雌二

熱帶假絲酵母 N6培養(yǎng)基皮質(zhì)

鼠李糖乳桿 NLN培養(yǎng)基AKT蛋白

維羅納假單胞 white培養(yǎng)基DNA甲基轉(zhuǎn)移3A

蘭鏈霉 檢定培養(yǎng)基6號(05藥典)DNA甲基轉(zhuǎn)移3B

空腸彎曲桿 沙門氏屬診VI因子血清I型膠原蛋白

蒼黃擬無枝 霍亂弧O139診斷血清γ干擾

解脂亞羅酵母 O1群霍亂弧診斷血清白介1

 沙門氏屬診斷血清白介12

炭疽芽孢桿 美迪衣原體白介2

條紋炭角 硅烷化試劑白介6

大腸桿 改良馬丁液體(疫苗)培養(yǎng)基白介8
操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

 


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