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貨號 | FS-X10489 |
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中文名稱:Syk抑制劑(GS-9973)
英文名稱:GS-9973
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
貨號:FS-X10489
產品介紹:
英文名稱:GS-9973 產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg GS-9973是一種選擇性的Syk抑制劑,IC50值為7.7nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:1229208-44-9 別名:Entospletinib 純度:99.23% 分子量:411.46 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
葡萄座腔菌磷化Src原癌基因抗體Anti-FLT1(VEGFR1) Antibody雄烯(ADT)
釀酒酵母SH2結構含磷肌SHIP1抗體Anti-FLT1 Antibody雄烯二(AED)
Sphingomonas desiccabilisC-SKI抗體Anti-FLT3 Antibody雄激誘導蛋白1(AIG1)
粘著劍菌磷化糖皮質激調節激1抗體Anti-FLT3 Antibody胸腺因子(TF)
枯草芽胞桿菌磷化核基質結合區結合蛋白1抗體Anti-FLT3LG Antibody胸腺β4(Tβ4)
謝瓦散囊菌磷化糖皮質激調節激1抗體Anti-FLT3LG Antibody胸腺β10(TMSβ10)
藤倉赤霉磷化糖皮質激調節激1抗體Anti-FLT3LG Antibody胸腺生成(TMPO)
薄層桿菌分泌型卷曲相關蛋白1抗體Anti-FLT4 Antibody胸腺旁腺(PTMS)
枯草芽孢桿菌精結合蛋白2抗體Anti-FLT4 Antibody胸腺激活調節趨化因子(TARC)
*灰葡萄孢溶質載體鋅轉運3抗體Anti-FMN1 Antibody胸腺表達趨化因子(TECK)
假諾卡氏菌絲蛋白抑制劑13抗體Anti-FMO1 Antibody胸腎表達趨化因子(BRAK)
加納鏈霉菌絲/蘇激25抗體Anti-FMO4 Antibody胸合成(TYMS)
尖孢鐮刀菌染色體特異性轉錄延伸因子抗體Anti-FMO2 Antibody胸嘧啶DNA糖基化(TDG)
新城疫病閱讀障礙相關蛋白Shootin抗體Anti-FMO3 Antibody性別決定區Y框蛋白9(SOX9)
殼蕉孢菌外紡錘體樣蛋白1抗體Anti-FMO5 Antibody性別決定區Y框蛋白3(SOX3)
煙色鏈霉菌溶質轉運蛋白家族44成員1抗體Anti-FMR1 Antibody性別決定區Y框蛋白2(SOX2)
硫酯2蛋白抗體燕麥狀曲霉ST豬睪丸細胞
超氧化物歧化3抗體解脂耶氏酵母YAC-1小鼠淋巴瘤細胞
可溶性載質轉運蛋白2B1抗體白曲霉HELF 人胚肺成纖維細胞
長鏈脂肪連接抗體紅曲紅曲菌MKN-28人胃癌高轉移細胞
Syk抑制劑(GS-9973)新疆糖絲 喹唑啉EB病抗體
海綿假單胞 十一烷基-β-D-麥芽糖NADH脫氫
鞘氨屬 羰酰二氫三(三苯基膦)釕(II)載脂蛋白C1
喬治亞青霉 蔗糖十二烷酯大鼠T表面糖蛋白CD1a
強雄腐霉 6-(1H-吡唑-1-基)煙整合α5
大彎桿 四丁3-羥基犬尿
粉紅聚端孢 3-乙酰-2,5-二甲基噻吩順烏頭
大腸埃希氏(大腸桿) 三氟磺鐿水合物因子信號轉導抑制因子3
產黃青霉 庚酰組蛋白脫乙?;?
Erythrobacter pelagi 2,5-二甲氧基溴苯過氧化4
季也蒙假絲酵母 羥基乙叉二膦 一水合物 (HEDP)可溶性血管內皮蛋白C受體
橄欖色青霉 2.6-二-4-硝基吡啶分泌型磷脂A2
南方樹舌 聚四?;趸?/span>
釀酒酵母 聚四抗人沙門氏桿抗體
紅淡紫灰鏈霉 聚(甲基乙烯基共聚馬來)17-β-羥基類固脫氫3
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