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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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Aurora B抑制劑(AZD1152-HQPA)

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-23 13:43:09瀏覽次數(shù):183次

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貨號(hào) FS-X10736
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HHC II (uman heparin cofactor II ) ELISA Kit 人肝輔因子Ⅱ4,4'-二二苯酮 99%
CA(Human Cholic acid) ELISA Kit 人

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

中文名稱:Aurora B抑制劑(AZD1152-HQPA)

英文名稱:AZD1152-HQPA

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號(hào):FS-X10736

產(chǎn)品介紹:

AZD1152-HQPA是一種高度選擇性的Aurora B抑制劑,IC50值為0.37nM,對Aurora B的選擇性是Aurora A的3700倍。

注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號(hào):722544-51-6

別名:Barasertib-HQPA;INH-34

純度:99.64%

分子量:507.56

儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

普通變形桿菌胸腺β10抗原Anti-ENTPD1 Antibody人腫瘤特異性抗原(TSA)  

羅氏菌屬新型血管活性因子UCN抗原(小鼠、大鼠)Anti-ENTPD1 Antibody人腫瘤特異性抗原(TSA)  

耐冷冷桿菌上游激因子1抗原Anti-EOMES Antibody人黑色瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)

孟氏假單胞菌泛蛋白Anti-EPG5 Antibody人黑色瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)

pBiFC-VN173 (Plasmid #22010)兔抗血管抑制蛋白1抗原Anti-EPGN Antibody人癌易感蛋白2(BRCA-2)

植物乳桿菌血管內(nèi)皮粘附分子抗原Anti-EPB41L2 Antibody人癌易感蛋白2(BRCA-2)

施氏假單胞菌血管內(nèi)皮粘附分子抗原Anti-EPHB4 Antibody人凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激I(ASK-1)

Chelativorans電壓依賴性陰離子通道抗原Anti-EPHA6 Antibody人凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激I(ASK-1)

淺被黑蛋巢血管內(nèi)皮生長因子(多肽抗原)Anti-EPHB2 Antibody人凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激I(ASK-1)

唾液鏈球菌血管內(nèi)皮生長因子A抗原Anti-EPHB6 Antibody人凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激I(ASK-1)

嘴突凸臍蠕孢血管內(nèi)皮生長因子C型抗原Anti-EPHX3 Antibody人Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)

中國擬迷孔菌血管內(nèi)皮生長因子受體2Anti-EPN1 Antibody人Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)

總狀共頭霉可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2Anti-EPHX4 Antibody人轉(zhuǎn)移因子(TF)

副氧化微桿菌血管內(nèi)皮生長因子受體-3(多肽)Anti-EPN2 Antibody人轉(zhuǎn)移因子(TF)

三葉草根瘤菌血管內(nèi)皮生長因子受體-3抗原Anti-EPN3 Antibody人結(jié)腸癌抗原(CCA)

雙孢蘑菇血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗原Anti-EPS8L2 Antibody人結(jié)腸癌抗原(CCA)

核轉(zhuǎn)錄因子抗體三線鐮孢菌人髓樣甲狀腺腫瘤細(xì)胞

轉(zhuǎn)錄因子SOX7抗體干酪乳桿菌人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞

卵子結(jié)合生成堿性螺旋蛋白抗體Naxibactervarians人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞

卵子結(jié)合生成堿性螺旋蛋白2抗體Lysinibacillusxylanilyticus人結(jié)直腸癌細(xì)胞
Aurora B抑制劑(AZD1152-HQPA)根瘤 環(huán)丁烷甲一氧化氮合

玫煙色棒束孢 3-芐鹽鹽1,25-二羥基維生D3

Talaromyces sp. 4-氟苯硫D二聚體

鏈孢囊 4-氟αS1酪蛋白

酯香微桿 4-氟硫代苯甲γ干擾

帕氏食氫產(chǎn)水 2--1,3-二甲基化咪唑鎓白介1

新疆鹽地桿 5-甲氧基-2-巰基苯并咪唑白介10

漢遜德巴利酵母 鹽洗必泰白介17

炭黑曲霉 2-氟-5-白介2

棕灰口蘑 2-苯基丁酰白介4

黑腐皮殼 4-氟-3-硝基三氟甲苯白介6

冷桿 2,4-二硝基-5-氟苯白介8

史氏芽孢桿 2,4-二氟表皮生長因子

斑玉蕈 4-溴-2-氟苯雌二

松口蘑 3-氟-4-甲氧基苯雌
操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

 


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