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非肽calpain抑制劑(PD150606)

參  考  價面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-24 15:31:49瀏覽次數:214次

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貨號 FS-X11074
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ADFP

產品介紹:

PD150606是一個選擇性的,能穿過細胞的非肽calpain抑制劑。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:179528-45-1

純度:98.0%

分子量:306.12

儲存條件:-20℃避光,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

中文名稱:非肽calpain抑制劑(PD150606)

英文名稱:PD150606

產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

貨號:FS-X11074

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

凝血mei(II)激活肽2抗體 Thrombin Activation peptide fragment 2

凝血mei(II)激活肽1抗體 Thrombin Activation peptide fragment 1

Tafazzin蛋白抗體 Tafazzin

TEC酪氨suan激mei蛋白抗體 TEC

鈣轉運蛋白1抗體 TRPV6

金屬蛋白mei組織抑制因子-2抗體 TIMP-2

腫瘤壞死因子配體超家族成員19抗體 TNFRSF19

腫瘤壞死因子配體超家族成員9抗體 TNFSF9

TATA框結合蛋白關聯因子12抗體 TAF12

轉錄延伸因子B2抗體 Elongin B

轉醛chunmei抗體 Transaldolase 1

兔抗jia狀腺球蛋白 TG
非肽calpain抑制劑(PD150606)匿名曲霉 甘露低聚糖

單色迷宮 蘋果多

球形節桿 氧化型輔Ⅱ單鈉鹽

噬甲基桿* 魔芋膠

沙福芽孢桿 1-氨基環烷羧

乳乳球乳亞種 無水乙鈉

枯草芽孢桿 乳糖

釀酒酵母 異麥芽酮糖

光神農球 阿拉伯半乳聚糖

粉肉擬層孔 膽

白靈側耳 D-a-氨基己二

蒼白鹽八疊球 豬膽鹽

熱帶假絲酵母 蔗糖脂肪酯

蠟樣芽孢桿 鹽柔紅霉

大腸埃希 磺甲氧噠

 


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