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微管(tubulin)抑制劑(MMAD)

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-24 15:27:40瀏覽次數:236次

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貨號 FS-X11070
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產品介紹:

MMAD是一種有效的微管(tubulin)抑制劑,是抗體藥物偶聯物(ADCs)中的活性分子。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:203849-91-6

別名:Demethyldolastatin 10;Monomethylauristatin D;Monomethyl Dolastatin 10

純度:99.28%

分子量:771.06

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

中文名稱:微管(tubulin)抑制劑(MMAD)

英文名稱:MMAD

產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號:FS-X11070

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

TTC33蛋白抗體 TTC33

四分子交聯體2抗體(四旋蛋白) TSPAN2

四分子交聯體3抗體(四旋蛋白) TSPAN3

T淋巴細胞白血病同源蛋白2抗體 TLX2

跨膜蛋白132A抗體 TMEM132A

四聚體多肽蛋白21B抗體 TTC21B

原肌球蛋白1抗體 Tropomyosin

轉錄增強因子TEF3抗體 TEF3

微管相關蛋白抗體 Tau protein

酪氨suan激meiA/B/C抗體 Trk A + B + C

核轉錄因子25抗體 Transcription factor 25

新型抑癌基因抗體 TBX2
微管(tubulin)抑制劑(MMAD)肉桂鏈霉 烯

細孢毛霉 Camaric acid

釀酒酵母 Buergerinin G

矮棒曲霉 沙紙寧C

擬無枝屬 Borreriagenin

節桿 Boeravinone B

普通裂褶 2-脫氧-2,2-二氟-D-赤型-1-呋喃酮糖-3,5-二苯甲酰酯

谷棒桿Ⅳ型 1,6-二磷果糖鎂鹽

羊肚(不能訂購) 1,6-二磷果糖一鈣鹽

彩色豆馬勃 L-阿拉伯樹膠糖

平菇 麥芽四糖

水生拉恩氏 L-甘露糖

煙管 5-尿三磷二鈉鹽

滑假絲酵母 酮

蒼白堿線 針葉櫻桃提取物

 


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