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活細(xì)胞染色液(Hoechst 33342)(100×)
細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(WST-1法)
| 貨號(hào) | FS-X9715 |
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產(chǎn)品介紹：
CFSE/PI 雙染細(xì)胞毒性檢測試劑盒是利用細(xì)胞熒光染料CFSE(CFDA-SE)和PI對細(xì)胞進(jìn)行染色，利用CFSE標(biāo)記靶細(xì)胞，PI標(biāo)記死的靶細(xì)胞來區(qū)分不同的細(xì)胞，活的靶細(xì)胞成綠色，死的靶細(xì)胞成紅色和綠色，從而檢測細(xì)胞毒性作用。根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)，可以用來檢測化合物的細(xì)胞毒性作用。也可以用來檢測殺傷性T 細(xì)胞或NK 細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用。 CFDA-SE 是一種可對活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的新型染料，可以標(biāo)記活體細(xì)胞。CFDASE是一種帶有琥珀酰亞胺(NHS)的熒光染料，可以結(jié)合細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)。CFDASE在結(jié)構(gòu)上將酚羥基部位改造成AM體，所以自身不發(fā)熒光，熒光背景低，脂溶性高，能夠輕易穿透細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的CFDASE的AM 部位能被細(xì)胞內(nèi)酯酶水解生成CFSE，通過共價(jià)結(jié)合賴氨酸側(cè)鏈的氨基而摻入細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞表面的蛋白，且結(jié)合后發(fā)出強(qiáng)的綠色熒光。CFSE的琥珀酰亞胺(NHS)和細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基部位結(jié)合，固定在細(xì)胞內(nèi)，不會(huì)漏出細(xì)胞外。CFSE進(jìn)入細(xì)胞后定位于細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核，在細(xì)胞核的熒光強(qiáng)。 CFSE毒性小，不影響細(xì)胞的增殖能力。此方法操作簡單，且不用放射性同位素，不存在安全隱患?？梢愿焖伲鼫?zhǔn)確和更安全地得到想要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。 CFSE/PI標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞毒性檢測。 CFSE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光，熒光波長：λex=496 nm,λem=516 nm。流式檢測時(shí)的激發(fā)波長可以選擇488nm，此時(shí)的發(fā)射波長為516nm，使用流式細(xì)胞儀檢測時(shí)可以采用FL1 detection channel。PI標(biāo)記細(xì)胞呈紅色熒光，流式檢測時(shí)的激發(fā)波長可以選擇488nm，此時(shí)的發(fā)射波長為647nm，使用流式細(xì)胞儀檢測時(shí)可以采用FL2 detection channel。 CFSE標(biāo)記的細(xì)胞除了流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞毒性外，還可單染后用于細(xì)胞增殖檢測，或者用熒光酶標(biāo)板定量活細(xì)胞數(shù)目，或者用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細(xì)胞示蹤觀察。 儲(chǔ)存條件：CFSE探針-20℃避光保存；溶解液-20℃保存；PI染色液2-8℃避光保存。 有效期：六個(gè)月。 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
500T | FS-X9715 |
注意事項(xiàng)：
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作步驟：
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
睪(T)英文名：T 載脂蛋白C1抗體包裝1g
高鐵血紅蛋白(MHB)英文名：MHB 載脂蛋白C2抗體包裝5g
高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)英文名：HMGB-1 載脂蛋白L1抗體包裝1g
高遷移率族蛋白1(HMGB1)英文名：HMGB1 載脂蛋白L4抗體包裝5g
高敏三碘狀腺原(u-T3)英文名：u-T3 載脂蛋白L5抗體包裝100g
高敏狀腺(u-T4)英文名：u-T4 載脂蛋白M抗體包裝25g
高密度脂蛋白膽固(HDL-C)英文名：HDL-C 載脂蛋白O抗體包裝500g
高靈敏度促狀腺激(U-TSH)英文名：U-TSH β淀粉樣蛋白前體蛋白結(jié)合蛋白1抗體包裝5g
高爾基蛋白73(GP-73)英文名：GP-73 共濟(jì)失調(diào)性眼球運(yùn)動(dòng)功能喪失相關(guān)蛋白AOA1抗體包裝1g
高半胱(Hcy)英文名：Hcy 三號(hào)染色體開放閱讀框抗體包裝1g
干燥綜合征抗原B(SSB)英文名：SSB 腺嘌呤磷核糖轉(zhuǎn)移抗體包裝1g
干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)英文名：SCF/MGF 磷化通道蛋白2抗體包裝25g
干擾誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)英文名：IP-10/CXCL10 ADP核糖基化因子1抗體包裝5g
干擾調(diào)節(jié)因子5(IRF5)英文名：IRF5 乙型肝炎病X相關(guān)蛋白2抗體包裝1g
肝脂(HL)英文名：HL ADP核糖基化因子5抗體包裝5g
溴區(qū)結(jié)構(gòu)域相鄰鋅指蛋白1A抗體轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)Biapenem is a carbapenem antibiotic with activity against both Gram-positive and
CFSE/PI雙染細(xì)胞毒性檢測試劑盒Marisediminicola 1,3-環(huán)辛二烯(含穩(wěn)定劑叔丁基鄰苯二酚)含Ⅲ型纖連蛋白域蛋白5
新月彎孢 5,6-二氟-2-羧酸含IQ基元GTP激活蛋白1
Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum 5,6-二氟和肽
香菇 四金酸三水合物核苷酸還原M1
耐輻射奇球突變株 4-氨基乙酯核基質(zhì)蛋白22
柱狀環(huán)傘（柳菇、茶新菇） 4-乙酸乙酯鹽酸鹽核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白質(zhì)1
高大毛殼 酸性紫49核仁
Achromobacter denitrificans (S)-5-甲基-2-惡唑烷酮核仁形成區(qū)嗜銀蛋白
米根霉 DL-炔基甘核糖核酸
嗜果刀孢 4-派啶乙酸甲酯核纖層蛋白A;C
暗產(chǎn)色鏈霉 1,2-環(huán)己基二甲酸二甲酯核心蛋白聚糖
鏈霉 2,4,5-三氟芐核因子E2相關(guān)因子2
大腸埃希氏桿 2,4-二甲基肉桂酸核因子κB
蘇云金芽孢桿 2,4-二甲基肉桂酸核因子κB受體活化因子
蘋果黑腐皮殼 2-甲基-4-吡啶羧酸甲酯核因子κB受體活化因子配基
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